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利用荧光原位杂交技术进行胚胎种植前遗传学诊断的研究及初步临床应用

发布时间:2020-12-24 20:19
  目的:1.建立安全、可行的胚胎活检方法;2.建立准确、可靠、稳定的可以应用于胚胎种植前遗传学诊断的FISH技术;3.利用荧光原位杂交技术对多元核发育而成的胚胎进行研究,分析多元核发育而成的胚胎染色体的异常性;4.利用荧光原位杂交技术对发育迟缓和胚胎碎片多的胚胎进行21号染色体分析,探讨21号染色体非整倍性与胚胎形态学指征的相关性;5.将荧光原位杂交技术应用于临床的胚胎种植前遗传学诊断。 方法:1.以小鼠8-细胞期胚胎为材料,利用酸性Tyrode’s法或机械切割法打孔,进行活检吸出1个卵裂球细胞,观察活检后小鼠胚胎的发育情况和囊胚形成率,比较两种方法是否有差异;2.收集受精后第三天的细胞数≤3的胚胎,进行固定和荧光原位杂交。3、将多原核发育成的受精后第二天的胚胎收集起来,用X染色体计数探针(CEPX,SpectrumGreen)和Y染色体计数探针(CEPY,SpectrumOrange)探针进行荧光原位杂交,观察IVF受精和ICSI受精的两组胚胎性染色体异常情况。4.将发育迟缓组和胚胎碎片40%组的胚胎,用21号染色体特殊位点探针(LSI21,SpectrumOrange)探针进行... 

【文章来源】:南方医科大学广东省

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

利用荧光原位杂交技术进行胚胎种植前遗传学诊断的研究及初步临床应用


沿虚线将肌肉层剪开

输卵管,卵巢,镊子,子宫


图l横切腹部皮肤,将皮肤上下尽量拉开图2沿虚线将肌肉层剪开图3将肠分开,暴露出卵巢和输卵管图4左手用镊子拉开子宫,右手用镊子将子宫、输卵管和卵巢从粘膜处分离开来图5左手用镊子拉起子宫,右手用剪刀从输卵管末端(靠近卵巢端)剪开,再从子宫与输卵管的连接出剪断卵管伞部)一下二二

镊子,子宫,输卵管,左手


图4左手用镊子拉开子宫,右手用镊子将子宫、输卵管和卵巢从粘膜处分离开来图5左手用镊子拉起子宫,右手用剪刀从输卵管末端(靠近卵巢端)剪开,再从子宫与输卵管的连接出剪断卵管伞部)「一下二二胚胎图6剪下来的带有胚胎的输卵管图7在体式显微镜下,用镊子将输卵管伞部轻轻滑动套住装有培养液的微玻璃管,用培养液将胚胎冲洗下来。


本文编号:2936253

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