骨髓间充质干细胞源性外泌体对体外培养的软骨细胞增殖和迁移的调节作用
发布时间：2020-12-30 00:51
目的:探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体对体外培养的软骨细胞增殖和迁移的调节作用。方法:体外分别培养新西兰兔的骨髓间充质干细胞（BMSCs）和软骨细胞;超高速离心法收集BMSCs源性外泌体（BMSC-Exos）;透射电镜观察BMSC-Exos的形状和大小;Western blot鉴定BMSC-Exos表面标记;MTT法检测不同剂量的BMSC-Exos对软骨细胞增殖的调节作用,以及给予IL-1β刺激后软骨细胞增殖的变化;荧光显微镜下观察软骨细胞对BMSC-Exos的摄取;划痕试验分析BMSC-Exos对软骨细胞迁移的调节作用。结果:获取的BMSC-Exos呈近似球形,直径40～100 nm,表面表达CD63和CD81。40μg/mL、80μg/mL和120μg/mL含量的外泌体均可显著促进软骨细胞增殖（P<0.05）,80μg/mL与120μg/mL含量外泌体的作用没有显著差异。BMSC-Exos能够被软骨细胞摄取。BMSC-Exos与软骨细胞共培养,划痕愈合率由44%上升至63%（P<0.05）。结论:BMSC-Exos能够促进体外培养的软骨细胞增殖和迁移,具有作为一种新型非细...
【文章来源】：中国运动医学杂志. 2019年01期 北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
BMSC-Exos的鉴定左：透射电镜观察外泌体（箭头所示为外泌体）；右：Westernblot检测外泌体表面蛋白标记
中国运动医学杂志2019年1月第38卷第1期ChinJSportsMed，Jan.2019，Vol.38，No.1的情况。如图4所示，BMSC-Exos被Dil标记为红色，软骨细胞的细胞核被DAPI标记为蓝色。通过荧光显微镜，观察到红色标记的BMSC-Exos能够被软骨细胞摄取，且在共培养8h的时候，BMSC-Exos主要集中在软骨细胞的细胞核周边。左：共培养4h；右：共培养8h图4荧光显微镜下观察软骨细胞对BMSC-Exos的摄取2.5BMSC-Exos能够促进软骨细胞迁移如图5和表1所示，软骨细胞培养24h后，划痕愈合率约44%，当给予软骨细胞BMSC-Exos共培养24h后，划痕间距明显减小，划痕愈合率上升至约63%，愈合率显著升高（P<0.05）。表1划痕愈合率（%，均数±标准差）组别对照组外泌体组愈合率44.29±4.2063.49±4.49**P<0.05，与对照组相比图5BMSC-Exos对软骨细胞迁移的影响2.6BMSC-Exos抑制IL-IL-1β诱导的软骨细胞增殖能力下降IL-1β是OA的重要前炎症细胞因子。因此在软骨细胞培养体系中加入BMSC-Exos和IL-1β，观察BMSC-Exos对软骨细胞的保护作用。如图6所示，IL-1β能够时间依赖性抑制软骨细胞的增殖（P<0.05），而BMSC-Exos能够完全逆转IL-1β的作用。*P<0.05，与对照组相比图6IL-1β刺激下BMSC-Exos对软骨细胞增殖的检测3讨论外泌体是由细胞分泌的，脂质双分子层包裹的，含有mRNA、miRNA和蛋白质等多种小分子的囊泡。几乎所有细胞均可产生外泌体，如免疫细胞、上皮细胞、干细胞、肿瘤细胞等[11，12]。随着研究的进展，细胞治疗逐渐受到重视。由于低
中国运动医学杂志2019年1月第38卷第1期ChinJSportsMed，Jan.2019，Vol.38，No.1的情况。如图4所示，BMSC-Exos被Dil标记为红色，软骨细胞的细胞核被DAPI标记为蓝色。通过荧光显微镜，观察到红色标记的BMSC-Exos能够被软骨细胞摄取，且在共培养8h的时候，BMSC-Exos主要集中在软骨细胞的细胞核周边。左：共培养4h；右：共培养8h图4荧光显微镜下观察软骨细胞对BMSC-Exos的摄取2.5BMSC-Exos能够促进软骨细胞迁移如图5和表1所示，软骨细胞培养24h后，划痕愈合率约44%，当给予软骨细胞BMSC-Exos共培养24h后，划痕间距明显减小，划痕愈合率上升至约63%，愈合率显著升高（P<0.05）。表1划痕愈合率（%，均数±标准差）组别对照组外泌体组愈合率44.29±4.2063.49±4.49**P<0.05，与对照组相比图5BMSC-Exos对软骨细胞迁移的影响2.6BMSC-Exos抑制IL-IL-1β诱导的软骨细胞增殖能力下降IL-1β是OA的重要前炎症细胞因子。因此在软骨细胞培养体系中加入BMSC-Exos和IL-1β，观察BMSC-Exos对软骨细胞的保护作用。如图6所示，IL-1β能够时间依赖性抑制软骨细胞的增殖（P<0.05），而BMSC-Exos能够完全逆转IL-1β的作用。*P<0.05，与对照组相比图6IL-1β刺激下BMSC-Exos对软骨细胞增殖的检测3讨论外泌体是由细胞分泌的，脂质双分子层包裹的，含有mRNA、miRNA和蛋白质等多种小分子的囊泡。几乎所有细胞均可产生外泌体，如免疫细胞、上皮细胞、干细胞、肿瘤细胞等[11，12]。随着研究的进展，细胞治疗逐渐受到重视。由于低
本文编号：2946652
【文章来源】：中国运动医学杂志. 2019年01期 北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
BMSC-Exos的鉴定左：透射电镜观察外泌体（箭头所示为外泌体）；右：Westernblot检测外泌体表面蛋白标记
中国运动医学杂志2019年1月第38卷第1期ChinJSportsMed，Jan.2019，Vol.38，No.1的情况。如图4所示，BMSC-Exos被Dil标记为红色，软骨细胞的细胞核被DAPI标记为蓝色。通过荧光显微镜，观察到红色标记的BMSC-Exos能够被软骨细胞摄取，且在共培养8h的时候，BMSC-Exos主要集中在软骨细胞的细胞核周边。左：共培养4h；右：共培养8h图4荧光显微镜下观察软骨细胞对BMSC-Exos的摄取2.5BMSC-Exos能够促进软骨细胞迁移如图5和表1所示，软骨细胞培养24h后，划痕愈合率约44%，当给予软骨细胞BMSC-Exos共培养24h后，划痕间距明显减小，划痕愈合率上升至约63%，愈合率显著升高（P<0.05）。表1划痕愈合率（%，均数±标准差）组别对照组外泌体组愈合率44.29±4.2063.49±4.49**P<0.05，与对照组相比图5BMSC-Exos对软骨细胞迁移的影响2.6BMSC-Exos抑制IL-IL-1β诱导的软骨细胞增殖能力下降IL-1β是OA的重要前炎症细胞因子。因此在软骨细胞培养体系中加入BMSC-Exos和IL-1β，观察BMSC-Exos对软骨细胞的保护作用。如图6所示，IL-1β能够时间依赖性抑制软骨细胞的增殖（P<0.05），而BMSC-Exos能够完全逆转IL-1β的作用。*P<0.05，与对照组相比图6IL-1β刺激下BMSC-Exos对软骨细胞增殖的检测3讨论外泌体是由细胞分泌的，脂质双分子层包裹的，含有mRNA、miRNA和蛋白质等多种小分子的囊泡。几乎所有细胞均可产生外泌体，如免疫细胞、上皮细胞、干细胞、肿瘤细胞等[11，12]。随着研究的进展，细胞治疗逐渐受到重视。由于低
中国运动医学杂志2019年1月第38卷第1期ChinJSportsMed，Jan.2019，Vol.38，No.1的情况。如图4所示，BMSC-Exos被Dil标记为红色，软骨细胞的细胞核被DAPI标记为蓝色。通过荧光显微镜，观察到红色标记的BMSC-Exos能够被软骨细胞摄取，且在共培养8h的时候，BMSC-Exos主要集中在软骨细胞的细胞核周边。左：共培养4h；右：共培养8h图4荧光显微镜下观察软骨细胞对BMSC-Exos的摄取2.5BMSC-Exos能够促进软骨细胞迁移如图5和表1所示，软骨细胞培养24h后，划痕愈合率约44%，当给予软骨细胞BMSC-Exos共培养24h后，划痕间距明显减小，划痕愈合率上升至约63%，愈合率显著升高（P<0.05）。表1划痕愈合率（%，均数±标准差）组别对照组外泌体组愈合率44.29±4.2063.49±4.49**P<0.05，与对照组相比图5BMSC-Exos对软骨细胞迁移的影响2.6BMSC-Exos抑制IL-IL-1β诱导的软骨细胞增殖能力下降IL-1β是OA的重要前炎症细胞因子。因此在软骨细胞培养体系中加入BMSC-Exos和IL-1β，观察BMSC-Exos对软骨细胞的保护作用。如图6所示，IL-1β能够时间依赖性抑制软骨细胞的增殖（P<0.05），而BMSC-Exos能够完全逆转IL-1β的作用。*P<0.05，与对照组相比图6IL-1β刺激下BMSC-Exos对软骨细胞增殖的检测3讨论外泌体是由细胞分泌的，脂质双分子层包裹的，含有mRNA、miRNA和蛋白质等多种小分子的囊泡。几乎所有细胞均可产生外泌体，如免疫细胞、上皮细胞、干细胞、肿瘤细胞等[11，12]。随着研究的进展，细胞治疗逐渐受到重视。由于低
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