结核分枝杆菌PPE25、PPE27和PE19蛋白对巨噬细胞RAW264.7的影响及表达ppe25基因的重组耻垢分枝杆菌的

发布时间：2020-12-30 06:35

　　结核病（Tuberculosis, TB）是由结核分枝杆菌复合群（Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC）感染引起的慢性呼吸道传染病,世界上三分之一的人口已被感染,每年新发病例接近九百万例,它在世界范围内传播、发病是其盛行的原因之一。pe/ppe基因占据结核分枝杆菌基因组编码区的10%,PE/PPE蛋白家族中一些成员被鉴定为是毒力因子,参与宿主免疫反应,但大部分PE/PPE蛋白的确切功能还需要探索,其中包括PPE25、PPE27和PE19蛋白。本研究利用原核体系表达和纯化获得的PPE25、PPE27、PE19蛋白与小鼠巨噬细胞RAW264.7相互作用以初步解析其生物功能。此外,为以后更深入地研究该家族蛋白的功能和在机体免疫调节中的作用,成功构建了带有FLAG标签的重组穿梭表达载体pMV261-ppe25,并电转化至无毒快速生长的耻垢分枝杆菌,从而获得重组菌株。1.结核分枝杆菌PPE25、PPE27和PE19蛋白对巨噬细胞RAW264.7细胞因子和死亡方式的影响纯化获得重组蛋白PPE25.PPE27和PE19,去除内毒素后经过鲎试剂测定内毒素含量... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２ＴＬＲ２信巧通路ＵＳ＇??巧ｇ．?２?ＴＬ民２?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ??ＴＬＲ４的基因定位于９号染色体，主要存在于单核巨隨细胞

Ｃｙｔｏｋｉｎｅ?／Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ?Ｓｔａｎｄａｒｄ?掠准品粉末溶于?２５０?ｎＬ?ＳＷ?后浓度是?１００００?ｐｇ／ｍＬ，按照梯??度稀释后，依次稀释成２０００、４００、８０、１６、３．２?ｐｇ／ｍＬ，系统检测自动生成际准曲线。如??图１－５所示，各细胞因子的相关系数Ｒ２在０．９７￣１．００之间，从而保证检测样品的准确性。??ＩＬ－６??圧－ＩＰ??拉，４２８％，Ｒ？，０燃?＊０．９３４??巧３－?／?巧４－??．－Ｉ?Ｌ??Ｌ?．??巧－，?如?如?巧Ｓ?巧１日１?１〇３?巧５??柳，＇?ｐｇ／ｍｌ??圧－１２ｐ４０?ＴＮＦ－ａ??议＊３欲，巧？０．繳?ＣＶ，１７槪，阵＂ＯＳ巧??１０?－?巧－?甲一??巧至－?巧２－??！日。＊?―—？■＂＇■—Ｔ???１?—＂－１?，０?－?＊ｆ?Ｉ?＇１??Ｉ?＇?＂°??１０．，?１＠＇?巧３?１０！?１０

隆??２５。ＰＨｈ??１００?齡??图２－２ｐｐｅ２５基因ＰＣＲ扩增琼脂糖凝胶电泳??Ｆｉｇ．?２－２?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｂｙ?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ??Ｍ：?ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：?ｐｐｅｌＳ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔ??２．３重组质粒ｐＭＶ２６１－／？ｐｅ２５的筛选及鉴定??（１）


本文编号：2947181