基因工程下游标准化体系工艺技术研究

发布时间：2020-12-31 13:59

　　基因工程产品的生产是一项十分复杂的系统工程，可分为上游和下游两个阶段，以分离目的基因、构建工程菌为主要内容的上游工艺是研制基因工程产品必不可少的基础，而作为下游工艺核心内容的工程菌的发酵培养、目的蛋白的分离纯化却直接控制着整个基因工程产品的质量、产量。本课题利用基因工程技术，重点从基因工程下游阶段着手研究，利用最新现代生物技术研究并建立经优化的高密度发酵工艺模式及高效分离纯化包涵体重组蛋白模式。 一．研究并建立一种适于目的蛋白高效表达的高密度发酵工艺模式 高密度发酵中，人们最关心的问题主要是质粒稳定性的维持、外源基因的高效表达及对下游纯化的影响。针对这些问题，我们采用分批补料培养的方法优化发酵培养基配方及部分发酵条件，探索出即适于外源基因高效表达，又利于产品纯化的发酵工艺。以我室构建并稳定表达的重组质粒pBV220-γ-IFN、pBV220-HGFα、pBV220-HGFβ、pBV220-hPK5为模型，分别从不同的表达宿主菌中筛选出一种适合大规模生产的菌种BL21（DE3），该工程菌株连续传代100代表达质粒不丢失，表达量稳定；采用B.Braun公司的BIOSTAT-C1... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 基因工程菌高密度发酵工艺的研究
    前言
    材料
    方法
    结果
    讨论
第二部分 包涵体重组蛋白纯化工艺的研究
    前言
    材料
    方法
    结果
    讨论
参考文献
综述
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位[J]. 王缚鲲,邹全明,张卫军,田文标,朱永红,杨珺,毛旭虎.  中国生物制品学杂志. 2002(01)
[2]重组人干扰素α2b包涵体纯化方法的研究[J]. 杨欣,曾献武,严君喜,王艳.  中国生化药物杂志. 2001(06)
[3]包涵体蛋白体外复性的研究进展[J]. 方敏,黄华樑.  生物工程学报. 2001(06)
[4]包含体蛋白质的复性研究进展[J]. 宁云山,李妍,王小宁.  生物技术通讯. 2001(03)
[5]精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立[J]. 吕宏亮,宋继萍,邹勇,王玉琳,周书全.  生物技术通讯. 2001(03)
[6]重组包涵体蛋白质的折叠复性[J]. 冯小黎.  生物化学与生物物理进展. 2001(04)
[7]新型重组人肿瘤坏死因子工程菌的发酵工艺研究[J]. 颜真,张英起,李民,陈常庆.  中国生化药物杂志. 2001(02)
[8]分泌型重组人生长激素工程菌的高密度发酵[J]. 李武平,王志武,朱丽娜,张雪梅,刘丽军,刘柱,盛君,郝淑美,孙宏,向泽敏.  中国生物制品学杂志. 2000(03)
[9]人白细胞介素18在大肠杆菌中的表达、纯化和复性[J]. 裴冬生,胡书群,赵惠仁.  生物化学与生物物理学报. 2000(04)
[10]重组人肝增强因子工程菌JM109的发酵工艺研究[J]. 李茹冰,单中元,付泳航,杨联萍,易学瑞,孔祥平.  中国生化药物杂志. 2000(02)



本文编号：2949732