镰刀菌素C在大鼠体内的代谢及其对大鼠食管上皮细胞生物学作用的研究

发布时间：2020-12-31 19:30

　　镰刀菌素C（FC）是从串珠镰刀菌培养提取物中分离到的一种致突，致癌的真菌毒素。串珠镰刀菌广泛存在于各种植物宿主中，并已查明这种霉菌是食管癌高发区玉米中的优势菌之一。给大鼠灌喂3H-FC后，小肠，前胃和肝放射性最高。肾、膀胱和食管次之，脾最低。血中放射性在给³H-FC后3小时达高峰。给予³H-FC后48小时内尿和粪便累积排出放射性占给予量的58.5％。³H-FC在大鼠体内有94.6％代谢转化成其他代谢产物。在体外大鼠食管组织培养中。³H-FC能与其DNA共价结合。但FC不能诱导大鼠食管上皮（REE）细胞非程序DNA合成增高。FC处理的REE细胞表现出以下恶性转化特征，能在无血清，无EGF的选择培养基中继续生长并能在半固体琼脂上形成集落；染色体核型已发生变化，数目增多，结构畸变；N-ras、C-myc和V-erb-B三种癌基因mRNA表达水平增高；失去了对TPA调常C-myc基因表达的反应；但未能在裸鼠体内形成肿瘤。这些结果表明这种细胞已处于癌前（Pre-neoplastic）阶段。 此外，原位杂... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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第一章 绪论
    一、串珠镰刀菌培养粗提物致突变和致癌作用研究概况
    二、FC致突变,致癌作用研究概况
    三、化学致癌过程中的细胞和分子变化
第二章 材料与方法
    一、串珠镰刀菌培养及FC提取
    二、3H—FC在大鼠体内的代谢
    三、3H—FC与大鼠食管DNA结合
    四、正常大鼠食管上皮细胞培养
        1.培养基和溶液
        2.基质
        3.原代细胞培养
        4.传代细胞培养
        5.培养细胞鉴定
    五、REE细胞的转化
        1.致癌物
        2.细胞
        3.致癌物处理及S9混合物配制
        4.转化细胞的早期初步筛选
        5.半固体琼脂生长和裸鼠致癌试验
        6.染色体制备
    六、UDS试验
    七、ras,myc和erb-B三种癌基因探针的原位杂交
        1.缺口翻译标记探针
        2.杂交液及杂交用溶液
        3.致癌物或促癌物处理细胞
        4.杂交前处理及杂交
        5.涂乳胶、暴光、显影和定影
        6.细胞银颗粒计数
第三章 结果
    一、3H—FC在大鼠体内的代谢
        1.3H—FC在大鼠组织中的分布
        2.血中放射性浓度—时间曲线
        3.3H—FC经尿和粪便的排泄
        4.尿中代谢产物的初步鉴定
    二、3H—FC在体外与大鼠食管DNA结合
    三、正常大鼠食管上皮细胞培养
        1.上皮细胞系
        2.细胞系特性
    四、FC对REE细胞的恶性转化作用
        1.转化细胞形态和生长特性
        2.相对存活率
        3.转化频率
        4.半固体琼脂集落形成率
        5.转化细胞染色体核型改变
        6.转化细胞的异体接种
ZA对REE细胞的转化作用">    五、NMB_ZA对REE细胞的转化作用
ZA转化作用的影响">    六、S9混合物对FC和NMB_ZA转化作用的影响
ZA诱导REE细胞UDS">    七、FC和NMB_ZA诱导REE细胞UDS
    八、N—ras,C—myc和V—erb—B癌基因mRNA在REE细胞中的表达
2T三种细胞癌基因mRNA表达水平的比较">        1.RE—525,RE—FC和B₂T三种细胞癌基因mRNA表达水平的比较
ZA对RF—525三种癌基因mRNA表达的影响">        2.FC和NMB_ZA对RF—525三种癌基因mRNA表达的影响
2细胞C—myc mRNA表达的影响">        3.TPA对RE—525,RE—FC和B₂细胞C—myc mRNA表达的影响
第四章 讨论
    一、FC在大鼠体内的代谢
    二、FC与大鼠食管DNA结合
    三、正常大鼠食管上皮细胞培养及恶性转化
ZA诱导REE细胞UDS">    四、FC和NMB_ZA诱导REE细胞UDS
    五、用原位杂交技术研究癌基因表达
第五章 结论
表格
致谢
参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]3H-氧化苦参碱在小鼠及大鼠体内的代谢[J]. 宋永良,董青莲,陈海燕,金月英.  中国医学科学院学报. 1986(04)
[2]串珠镰刀菌培养物对小鼠诱癌作用的初步研究[J]. 王朝俊,罗德元,邓士林,叶树森.  华西医科大学学报. 1986(02)
[3]林县谷物中常见的真菌[J]. 李铭新,马吉林,樊卫国,孙鹤龄,吴铁玲,王克强.  癌症. 1986(03)
[4]二乙基亚硝胺体外诱发人胎儿肾上皮细胞恶性转化的研究[J]. 黄明,王秀琴,王志华,周传农,吴旻.  中国科学（B辑 化学 生物学 农学 医学 地学）. 1986(05)
[5]霉变玉米面致突变作用的初步研究[J]. 程书钧,李铭新,王英林,Chouroulinkov,I..  实验生物学报. 1982(01)
[6]串珠镰刀菌培养物对小鼠食管及前胃致癌及辅致癌作用的病理学研究[J]. 王朝俊,罗德元,邓士林,叶树森.  中华病理学杂志. 1987 (02)



本文编号：2950182