FSHβ在BMP9诱导间充质干细胞成骨分化中的作用研究

发布时间：2020-12-31 23:22

　　目的探讨卵泡刺激素β亚基（follicle-stimulating hormoneβ-subunit,FSHβ）在骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）成骨分化中的作用及可能的机制。方法利用细胞化学染色方法检测处理因素（重组腺病毒或γ促分泌酶抑制剂DAPT）作用于间充质干细胞5 d后细胞中碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色的变化。通过实时定量PCR（quantitative real-time PCR,Q-PCR）检测BMP9 mRNA、FSHβmRNA和Notch信号通路靶基因（Hey1） mRNA的表达水平。利用茜素红S（alizarin red S,ARS）染色检测腺病毒感染间充质干细胞21 d后细胞中钙盐的沉积情况。结果 FSHβ处理组ALP表达较GFP对照组无明显改变,BMP9处理组ALP表达较GFP对照组明显增加,而BMP9与FSHβ联合处理组ALP表达较BMP9处理组显著增加。另外,BMP9处理组晚期成骨标志物钙盐结节、... 

【文章来源】：中国骨质疏松杂志. 2019年06期 北大核心

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料及方法
    1.1 试剂与细胞培养
    1.2 目标重组腺病毒 （GFP、BMP9、FSHβ） 构建
    1.3 实验分组与重组腺病毒滴度、药物浓度测定
    1.4 ALP表达检测
    1.5 茜素红S染色测定钙盐结节
    1.6 细胞总RNA提取、逆转录以及实时荧光定量PCR实验
    1.7 数据分析
2 结果
    2.1 C3H10T1/2细胞感染重组腺病毒后相应腺病毒mRNA的表达检测和ALP检测
    2.2 FSHβ增加BMP9诱导C3H10T1/2细胞的ALP表达
    2.3 FSHβ增强BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨中钙盐的沉积
    2.4 FSHβ增强BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中Notch信号的表达
    2.5 DAPT抑制FSHβ增强BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中ALP的表达
    2.6 DAPT抑制FSHβ增强BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中Notch信号的表达
3 讨论



本文编号：2950494