桂枝茯苓胶囊对EM模型大鼠异位内膜细胞凋亡、VEGF及血清雌孕激素的影响
发布时间：2021-01-02 16:11
目的以自体移植法建立EM大鼠模型,观察桂枝茯苓胶囊对EM大鼠异位内膜细胞凋亡、VEGF及血清雌、孕激素含量的影响,探讨其治疗EM的效应机制。方法采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,术后4周将造模成功大鼠随机分为模型组、米非司酮组、散结镇痛胶囊组、桂枝茯苓胶囊高、中、低剂量组,药物干预4周后进行大鼠异位内膜细胞凋亡TUNEL法检测,检测大鼠血清中雌、孕激素的含量,免疫组化法检测Caspase-7、VEGF、survivin表达。结果桂枝茯苓高剂量组异位内膜细胞凋亡率显著高于模型组,桂枝茯苓高剂量组及米非司酮组异位内膜Caspase-7表达均较模型组显著升高,VEGF、survivin表达及血清雌、孕激素含量显著降低。结论桂枝茯苓胶囊治疗EMS的疗效机制,可能与诱导异位内膜细胞凋亡、下调survivin的高表达、降低VEGF表达及调节血清中雌孕激素水平密切相关。
【文章来源】：南京中医药大学学报. 2019年01期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
图１光镜下大鼠阴道脱落细胞涂片（×２００）造模方法在大鼠动情期采用自体移植法动情前期动情前期动情后期动情间期
饲料适应性喂养１周，经ＨＥ染色后光镜下观察，连续１０ｄ，并建立动情周期档案，选择动情周期规律的大鼠１３５只纳入实验。见图１。动情前期动情前期动情后期动情间期图１光镜下大鼠阴道脱落细胞涂片（×２００）１．４．２造模方法在大鼠动情期采用自体移植法手术［２］建立动物模型。建模成功的标志（如图２）为肉眼可见移植物呈囊性增大，形成囊肿，囊内有液体积聚，表面有新生血管形成，有的移植物被结缔组织覆盖。图２造模成功１．４．３实验分组及给药经剖腹证实造模成功的大鼠随机分为模型组、散结镇痛组、米非司酮组、桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组，每组１５只，灌胃过程中模型组和高剂量组各死亡１只，剩余１４只，其余每组１５只。根据施新猷《现代医学实验动物学》［３］中公式计算，模型组：每１００ｇ灌胃生理盐水１ｍＬ。散结镇痛胶囊组：每１００ｇ给予含生药量０．０５ｇ／ｍＬ的散结镇痛胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。米非司酮组：每１００ｇ给予含生药量０．１０４ｇ／ｍＬ的米非司酮混悬液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓胶囊低剂量组：每１００ｇ给予含生药量０．０１４５ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓胶囊中剂量组：每１００ｇ给予含生药量０．０２９ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓胶囊高剂量组：每１００ｇ给予含生药量０．０５８ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。所有给药均１次／ｄ，连续４
，计算细胞的凋亡率，凋亡率＝凋亡细胞数／总细胞数×１００％；（５）双抗体夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测各组大鼠血清雌、孕激素含量。１．４．６统计学分析所有数据采用珚ｘ±ｓ表示，两两比较用ｔ检验，数据用统计学软件ＳＰＳＳ２１．０进行统计学分析，Ｐ＜０．０５视为差异具有统计学意义。２结果２．１光镜下观察大鼠异位内膜组织病理形态学改变结果见图３。模型组桂高组桂中组桂低组米非组散结组图３大鼠异位内膜组织ＨＥ染色（×１００）２．２用药前后异位病灶体积比较结果见表１。表１用药前后异位病灶体积比较（珚ｘ±ｓ）组别ｎ给药前／ｍｍ３给药后／ｍｍ３模型组１４１３９．１０±１２．８４１４４．３２±１８．０２＊桂高组１４１３８．１１±１１．７４１１１．３４±８．５６＊△桂中组１５１３９．２３±１０．５６１１５．１１±８．１３＊△桂低组１５１３８．１４±１０．７８１２１．８８±１０．７１＊△＃米非组１５１３７．５６±９．８９１１０．２２±７．５８＊△散结组１５１３７．９８±１０．６６１２１．９６±１１．８１＊△＃注：用药前后比较，＊Ｐ＜０．０５。与模型组比较，△Ｐ＜０．０５；与桂高、米非组对比，＃Ｐ＜０．０５。２．３ＴＵＮＥＬ法检测大鼠异位内膜细胞凋亡图片及桂枝茯苓胶囊对大鼠异位内膜细胞凋亡率的影响２．３．１ＴＵＮＥＬ法检测大鼠异位内膜细胞凋亡结果见图４。模型组桂高组桂中组桂低组米非组散结组图４ＴＵＮＥＬ法
【参考文献】：
期刊论文
[1]Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J]. 杨涛,费振海,钟兴明. 浙江医学. 2018(18)
[2]桂枝茯苓丸治疗子宫内膜异位症的临床及机制研究进展[J]. 胡妮娜,赵闯,张金琦,王旭,杨东霞,吴修红. 中医药学报. 2017(04)
[3]不同类型子宫内膜异位症临床特点及意义分析[J]. 李雅男,王丹波,陈英汉,李妍. 实用妇产科杂志. 2015(01)
[4]消异方对子宫内膜异位症大鼠血清E2、P含量的影响[J]. 肖新春,崔晓萍. 中国中医药科技. 2013(05)
[5]芳香化酶抑制剂对大鼠子宫内膜异位灶中生存素及Caspase-3的影响[J]. 齐之迎,尹利荣,马洪达,宋淑芳. 天津医药. 2011(03)
[6]细胞凋亡与子宫内膜异位症[J]. 梁琤,吴瑞瑾,林俊. 国际妇产科学杂志. 2009(05)
本文编号：2953221
【文章来源】：南京中医药大学学报. 2019年01期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
图１光镜下大鼠阴道脱落细胞涂片（×２００）造模方法在大鼠动情期采用自体移植法动情前期动情前期动情后期动情间期
饲料适应性喂养１周，经ＨＥ染色后光镜下观察，连续１０ｄ，并建立动情周期档案，选择动情周期规律的大鼠１３５只纳入实验。见图１。动情前期动情前期动情后期动情间期图１光镜下大鼠阴道脱落细胞涂片（×２００）１．４．２造模方法在大鼠动情期采用自体移植法手术［２］建立动物模型。建模成功的标志（如图２）为肉眼可见移植物呈囊性增大，形成囊肿，囊内有液体积聚，表面有新生血管形成，有的移植物被结缔组织覆盖。图２造模成功１．４．３实验分组及给药经剖腹证实造模成功的大鼠随机分为模型组、散结镇痛组、米非司酮组、桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组，每组１５只，灌胃过程中模型组和高剂量组各死亡１只，剩余１４只，其余每组１５只。根据施新猷《现代医学实验动物学》［３］中公式计算，模型组：每１００ｇ灌胃生理盐水１ｍＬ。散结镇痛胶囊组：每１００ｇ给予含生药量０．０５ｇ／ｍＬ的散结镇痛胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。米非司酮组：每１００ｇ给予含生药量０．１０４ｇ／ｍＬ的米非司酮混悬液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓胶囊低剂量组：每１００ｇ给予含生药量０．０１４５ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓胶囊中剂量组：每１００ｇ给予含生药量０．０２９ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓胶囊高剂量组：每１００ｇ给予含生药量０．０５８ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓胶囊混悬液灌胃１ｍＬ。所有给药均１次／ｄ，连续４
，计算细胞的凋亡率，凋亡率＝凋亡细胞数／总细胞数×１００％；（５）双抗体夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测各组大鼠血清雌、孕激素含量。１．４．６统计学分析所有数据采用珚ｘ±ｓ表示，两两比较用ｔ检验，数据用统计学软件ＳＰＳＳ２１．０进行统计学分析，Ｐ＜０．０５视为差异具有统计学意义。２结果２．１光镜下观察大鼠异位内膜组织病理形态学改变结果见图３。模型组桂高组桂中组桂低组米非组散结组图３大鼠异位内膜组织ＨＥ染色（×１００）２．２用药前后异位病灶体积比较结果见表１。表１用药前后异位病灶体积比较（珚ｘ±ｓ）组别ｎ给药前／ｍｍ３给药后／ｍｍ３模型组１４１３９．１０±１２．８４１４４．３２±１８．０２＊桂高组１４１３８．１１±１１．７４１１１．３４±８．５６＊△桂中组１５１３９．２３±１０．５６１１５．１１±８．１３＊△桂低组１５１３８．１４±１０．７８１２１．８８±１０．７１＊△＃米非组１５１３７．５６±９．８９１１０．２２±７．５８＊△散结组１５１３７．９８±１０．６６１２１．９６±１１．８１＊△＃注：用药前后比较，＊Ｐ＜０．０５。与模型组比较，△Ｐ＜０．０５；与桂高、米非组对比，＃Ｐ＜０．０５。２．３ＴＵＮＥＬ法检测大鼠异位内膜细胞凋亡图片及桂枝茯苓胶囊对大鼠异位内膜细胞凋亡率的影响２．３．１ＴＵＮＥＬ法检测大鼠异位内膜细胞凋亡结果见图４。模型组桂高组桂中组桂低组米非组散结组图４ＴＵＮＥＬ法
【参考文献】：
期刊论文
[1]Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J]. 杨涛,费振海,钟兴明. 浙江医学. 2018(18)
[2]桂枝茯苓丸治疗子宫内膜异位症的临床及机制研究进展[J]. 胡妮娜,赵闯,张金琦,王旭,杨东霞,吴修红. 中医药学报. 2017(04)
[3]不同类型子宫内膜异位症临床特点及意义分析[J]. 李雅男,王丹波,陈英汉,李妍. 实用妇产科杂志. 2015(01)
[4]消异方对子宫内膜异位症大鼠血清E2、P含量的影响[J]. 肖新春,崔晓萍. 中国中医药科技. 2013(05)
[5]芳香化酶抑制剂对大鼠子宫内膜异位灶中生存素及Caspase-3的影响[J]. 齐之迎,尹利荣,马洪达,宋淑芳. 天津医药. 2011(03)
[6]细胞凋亡与子宫内膜异位症[J]. 梁琤,吴瑞瑾,林俊. 国际妇产科学杂志. 2009(05)
本文编号：2953221
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