中国4株伯氏疏螺旋体5s-23srRNA基因间隔区的克

发布时间：2021-01-05 21:02

　　目的：对广西、贵州的4株伯氏疏螺旋体分离株进行基因种鉴定，进而克隆其外膜蛋白A（OSPA），测序分析其变异情况，体外表达OSPA基因，获取OSPA蛋白，为制备诊断试剂和疫苗研究作基础准备。方法：利用5s-23srRNA（rrf-rrl）基因间隔区引物进行PCR扩增，其产物插入质粒pGEM-T Easy中，构建重组质粒，经测序并与国外分离株进行同源性比较，鉴定4株伯氏疏螺旋体（GXLD-4、9、18和长14）的基因型。应用PCR技术、分子克隆、原核表达等方法从4株伯氏疏螺旋体全细胞DNA组中扩增得到OSPA基因，分别克隆到质粒pGEM-T Easy上，对阳性克隆进行测序和序列分析，与国外分离株进行同源性比较，并用限制性内切酶NdeI和XhoI从重组质粒pGEM-T Easy-OSPA上将OSPA基因切下，分别克隆到表达载体pET3oa中，在大肠杆菌BL₂1中进行表达。结果：GXLD-4、9、18及长14株（贵州）均可扩增出242bp的5s-23srRNA间隔区基因，同源性达99％以上。与Borrelia valaisiana基因种的同源性均比其他基因种高，核苷酸同源... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
一、 英文缩写
二、 摘要
    1 中文摘要
    2 英文摘要
三、 论文
    第一部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    第二部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
四、 综述
五、 致谢


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2959296