可溶性DC-SIGN和病毒性趋化因子vMIP2的重组表达和抗HIV-1的研究

发布时间：2021-01-19 14:11

　　本论文共分为三章。第一章是前言综述，介绍了近年来在艾滋病研究领域中HIV（Human immunodeficiency virus）侵入细胞这一过程的研究进展。分为3个部分：艾滋病的流行现状、HIV辅助受体研究进展和DC-SIGN（dendritic-cell-specific ICAM-grabbing nonintegrin）与HIV感染。第二章是DC-SIGN融合蛋白的表达、纯化和活性分析。从树突状细胞（Dendritic Cells，DC）的mRNA扩增出DC-SIGN基因，克隆到载体pcDNA3.1。重新设计引物，用PCR法扩增出DC-SIGN凝集素片段的cDNA，克隆到表达载体pET32-a（+）。酶切、序列分析表明该外源基因已成功克隆到载体上，并且读码框正确。用CaCl2法将重组载体转化大肠杆菌AD494（DE3），诱导后SDS-PAGE分析显示DC-SIGN融合蛋白在该原核表达系统中高效表达。利用融合蛋白上的（His）6序列，用亲和层析的方法纯化出该融合蛋白，并用Western blot实验进行验证。DC-SIGN融合蛋白与HIV的亲和实验表明该蛋白可以竞争性的抑制HI... 

【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院武汉病毒研究所)湖北省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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中文摘要
英文摘要
英文缩写表
第一章 前言综述
    1 艾滋病的流行现状
    2 HIV辅助受体研究进展
    3 DC-SIGN和HIV感染
    本研究论文的目标和内容
第二章 可溶性DC-SIGN的表达、纯化及其生物学活性分析
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">    <中文关键词>
    材料和方法
        1 材料
        2 实验方法
    结 果
        1 重组表达质粒pET-32a（+）-dlectin的构建
        2 重组质粒pET-32a（+）-dlectin的酶切鉴定
        3 重组质粒pET-32a（+）-dlectin的诱导表达
        4 DC-SIGN 融合蛋白的亲和纯化
        5 DC-SIGN 融合蛋白的Western blot鉴定
        6 DC-SIGN 融合蛋白生物活性分析
    讨论
第三章 病毒性趋化因子vMIP2的表达、纯化及抗HIV-1的研究
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">    <中文关键词>
    材料和方法
        1 材料
        2 实验方法
    结果
        1 重组表达质粒pET-32a（+）-vmip2的构建
        2 重组表达质粒pET-32a（+）-vmip2的酶切和PCR验证
        3 重组表达质粒pET-32a（+）-vmip2诱导表达
        4 vMIP2的纯化
        5 vMIP2的Western blot鉴定
        6 vMIP2抗HIV-1的活性分析
讨论
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参考文献
发表和待发表的文章
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]以CCR5为作用靶点的抗艾滋病药物的研究进展[J]. 马新锋,张先恩,胡勤学.  细胞与分子免疫学杂志. 2002(06)
[2]趋化因子超家族研究进展[J]. 刘祝公,陈慰峰.  生命科学. 1996(03)



本文编号：2987140