骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪源干细胞分化成棕色样脂肪细胞的影响

发布时间：2021-01-22 15:52

　　目的探讨骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪组织脂肪源间充质干细胞（AD-MSCs）诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响。方法分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织（i BAT）、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织（s WAT）和附睾白色脂肪组织（e WAT）,分别提取脂肪源间充质干细胞培养,用骨形成蛋白7诱导干细胞分化。细胞免疫荧光染色、油红O染色鉴定棕色样脂肪细胞,PCR法检测棕色脂肪相关基因表达。结果 i BAT和s WAT组诱导细胞中出现成簇聚集的空泡状细胞,空泡状细胞油红O染色为红色,解偶联蛋白1免疫荧光染色阳性。e WAT组仅有散在的空泡状细胞,解偶联蛋白1免疫荧光染色阴性。反转录PCR显示i BAT和s WAT组细胞高表达解偶联蛋白1基因,未检测到e WAT组细胞表达解偶联蛋白1基因。结论大鼠体内不同部位脂肪组织源干细胞的基因表达及分化潜能不同。 

【文章来源】：中国医学科学院学报. 2014,36(06)北大核心

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【部分图文】：

培养第7天光学显微镜下大鼠AD-MSCs的形态(×40)

成蛋白7对大鼠不同部位脂肪源干细胞分化成棕色样脂肪细胞的影响Vol.36No.6657因表达水平高于iBAT细胞;sWAT组细胞经BMP7诱导后PＲDM16基因表达幅度明显高于iBAT组细胞，而eWAT组细胞经BMP7诱导后PＲDM16基因表达却低于对照组(P均＜0.05)(图6)。AD-MSCs:脂肪源间充质干细胞AD-MSCs:adipose-derivedmesenchymalstemcells图1培养第7天光学显微镜下大鼠AD-MSCs的形态(×40)Fig1MorphologyofratAD-MSCsontheseventhdaybyusingopti-calmicroscope(×40)PE:藻红蛋白;APC:别藻蓝蛋白PE:phycoerthrin;APC:allophycocyanin图2大鼠AD-MSCs表面分子CD29、CD45的流式细胞术检测结果Fig2ＲesultsoftheflowcytometryonratAD-MSCscellsurfacemoleculesCD29andCD45iBAT:肩胛间区棕色脂肪组织;BMP7:骨形成蛋白7iBAT:interscapularbrownadiposetissue;BMP7:bonemorphoge-neticprotein7A.光学显微镜下分化脂肪样细胞的形态(×100);B.UCP1的免疫荧光染色结果(×100)A.morphologiesofAD-MSCsdifferentiationonopticalmicroscope(×100);B.immunofluorescencestainingofUCP1(×100)图3iBAT来源AD-MSCs经BMP7诱导6d后的细胞形态Fig3MorphologiesofAD-MSCsisolatedfromiBATafterBMP7in-ductionfor6days图4脂肪样细胞油红“O”染色结果(×100)Fig4Adipocytesstainedbyoilred“O”(×100)sWAT:腹股沟皮下白色脂肪组织;eWAT:附睾白色脂肪组织;M:marker;Con:对照组sWAT:inguinalsubcutaneouswhiteadiposetissue;eWAT:epidid-ymalwhiteadiposetissue;M:marker;Con:controlgroup图5BMP7诱导6d后，iBAT、sWAT和eWAT组细胞表达UCP1基因的ＲT-PCＲ检测结果Fig5ＲT-PCＲresultofUCP1geneexpressionofAD-MSCsisolatedfromiBAT，sWAT，andeWATafterBMP7induc

果Fig2ＲesultsoftheflowcytometryonratAD-MSCscellsurfacemoleculesCD29andCD45iBAT:肩胛间区棕色脂肪组织;BMP7:骨形成蛋白7iBAT:interscapularbrownadiposetissue;BMP7:bonemorphoge-neticprotein7A.光学显微镜下分化脂肪样细胞的形态(×100);B.UCP1的免疫荧光染色结果(×100)A.morphologiesofAD-MSCsdifferentiationonopticalmicroscope(×100);B.immunofluorescencestainingofUCP1(×100)图3iBAT来源AD-MSCs经BMP7诱导6d后的细胞形态Fig3MorphologiesofAD-MSCsisolatedfromiBATafterBMP7in-ductionfor6days图4脂肪样细胞油红“O”染色结果(×100)Fig4Adipocytesstainedbyoilred“O”(×100)sWAT:腹股沟皮下白色脂肪组织;eWAT:附睾白色脂肪组织;M:marker;Con:对照组sWAT:inguinalsubcutaneouswhiteadiposetissue;eWAT:epidid-ymalwhiteadiposetissue;M:marker;Con:controlgroup图5BMP7诱导6d后，iBAT、sWAT和eWAT组细胞表达UCP1基因的ＲT-PCＲ检测结果Fig5ＲT-PCＲresultofUCP1geneexpressionofAD-MSCsisolatedfromiBAT，sWAT，andeWATafterBMP7inductionfor6days

【参考文献】：
期刊论文
[1]Distinction of white,beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells[J]. Anna Park,Won Kon Kim,Kwang-Hee Bae.  World Journal of Stem Cells. 2014(01)



本文编号：2993502