5-aza体外诱导人骨髓干细胞为心肌样细胞研究

发布时间：2021-01-23 04:15

　　一般认为心肌细胞为终末分化细胞,故心肌梗死（心梗）后患者的冠状动脉闭塞,心肌细胞发生坏死,形成斑痕结构,引发梗死区心室壁变薄,心室重构,最终引发心力衰竭及心源性卒死。近来,将体外纯化,培养的心肌细胞或非心肌细胞移植到受损的心肌中,来代替坏死的心肌组织,称为细胞心肌成形术（cellularcardiomyoplasty ,CCM）,目前骨髓干细胞移植治疗心肌梗死已成为研究热点。目的:探讨应用5-aza（5-氮胞苷）诱导体外培养人骨髓干细胞向心肌细胞分化作用,为临床干细胞移植提供初步实验依据。方法:本文通过采取正常志愿者髂后上棘穿刺点获得骨髓干细胞,于10%人血清的培养基的L-DMEM,37℃,5%CO2的孵育箱中培养,传3代后,分为诱导组及对照组,诱导组细胞应用5×10-6mmol/L5-aza（Sigma公司）,诱导20小时后继续原10%人血清的培养基的L-DMEM,于37℃,5%CO2的孵育箱中培养,对照原液及原培养条件培养,不加任何干扰因素,定时换液,传代,相差显微镜下观察细胞形态并照相记录。诱导组细胞行人a-action Trophonin T免疫组化染色。并进一步行RT-PCR... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：31 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

见大量初接种细胞：骨髓干细胞及红细胞，为圆形或椭圆型，以圆形为主，大小不一，无法分辨细胞核（100倍普通光镜）

24小时后细胞换液时，发现红细胞脱漏，部分细胞贴于瓶底，

3：第 5 天时细胞开始传代，传代后细胞生长迅速，角型，长菱型（400 倍倒置显微镜）100 倍普通光镜（绿色滤光镜）图 4：传代后细胞生长迅速，逐渐变长，细胞呈同心（200 倍普通绿色滤光镜）

【参考文献】：
期刊论文
[1]胚胎干细胞及其心肌细胞定向分化研究进展[J]. 康新勤,臧伟进,宋土生,臧益民.  心脏杂志. 2003(02)
[2]干细胞移植与心血管疾病[J]. 张航向,李源,臧益民.  心脏杂志. 2002(06)



本文编号：2994528