恒河猴增龄过程中miR-16-5p及靶基因在外周血白细胞中的表达变化

发布时间：2021-02-10 11:23

　　目的明确衰老相关microRNA与恒河猴增龄的相关性。方法将猴群参照人类增龄划分为幼年、成年、老年和长寿,提取外周血白细胞的总RNA;用real-time PCR检测外周血白细胞中的microRNA及VEGFA、GHR、TBP、INSR、CLOCK、IKBKB、PIK3R1、LRP2、SSTR3、IGF1R、BCL2、PPM1D、IRS1、MAPK8、ADCY5、APP、NFE2L1、BDNF和PEX5的表达;利用microRNA靶基因预测网站miRwalk、TargetSan、miRecords、miRDB预测miR-16-5p的靶基因,并与人类衰老基因库（http://genomics.senescence.info/）对接。结果在增龄过程中,恒河猴外周血白细胞中miR-16-5p的表达量随年龄增长而增加（P<0.001）;多个网站对miR-16-5p靶基因预测得到539个潜在的靶基因,与人类衰老基因组库对接后有19个基因重合;有10个基因的mRNA在恒河猴增龄过程中存在差异表达,其中, IKBKB、PIK3R1、IRS1的表达随着年龄的增加逐渐下降。结论在自然衰老恒河猴的外... 

【文章来源】：基础医学与临床. 2019,39(07)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

mircoＲNA在增龄恒河猴血液白细胞中的表达量变化A.real-timePCＲanalysisofmicroＲNAinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=6);B.real-timePCＲanalysisofmiＲ-16-5pinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=19);*P＜0.001comparedwithinfantgroup

ＲanalysisofmicroＲNAinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=6);B.real-timePCＲanalysisofmiＲ-16-5pinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=19);*P＜0.001comparedwithinfantgroup图1mircoＲNA在增龄恒河猴血液白细胞中的表达量变化Fig1ExpressionofmicroＲNAinleukocytesofagingrhesusmonkeys(x±s，n=6)A.WaynediagramofmiＲ-16-5ptargetgenepredictedbymiＲwalk，TargetSan，miＲecordsandmiＲDB;B.Waynedia-gramofmiＲ-16targetgeneandHumanAgeingGenomicＲesources图2增龄恒河猴血液白细胞中miＲ-16-5p靶基因的预测Fig2PredictionofmiＲ-16-5ptargetgenesinleukocytesofagingrhesusmonkeys2.3自然增龄恒河猴外周血白细胞中miＲ-16-5p潜在的靶基因的表达变化情况检测了预测得到的19条mＲNA在增龄恒河猴外周血白细胞中的表达，其中在样本中检测到了10条mＲNA(其余未检测到)(图3):IGF1Ｒ和PEX5的表达均在幼年组、成年组和老年组中逐渐升高，在长寿组中降低，且相对于幼年组来说其表达量仅在老年组呈显著差异(IGF1ＲP＜0.01;PEX5P＜0.05)。而TBP(P＜0.01)，PIK3Ｒ1(P＜0.05)仅在长寿组中显著降低，其余几乎没有变化;IKBKB的表达相对于幼年组来说在成年组(P＜0.05)，老年组(P＜0.05)和长寿组(P＜0.01)中均显著下降;IＲS1的表达则在老年组(P＜0.05)，长寿组(P＜0.05)中显著降低。CLOCK、BCL、APP和NFE2L1的表达量的差异在各组间则无统计学意义。3讨论衰老是生物体随年龄增长面临的机体各个功能的渐进性丧失，而非人灵长类在进化上最接近于人类，所以将恒河猴用作实验?

ma-2596PPM1Dproteinphosphatase，Mg2+/Mn2+dependent1D8493IＲS1insulinreceptorsubstrate13667MAPK8mitogen-activatedproteinkinase85599ADCY5adenylatecyclase5111APPamyloidbetaprecursorprotein351NFE2L1nuclearfactorerythroid2-relatedfactor14779BDNFbrainderivedneurotrophicfactor627PEX5peroxisomalbiogenesisfactor55830Ｒeal-timePCＲanalysisofmiＲ-16targetgeneinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood;*P＜0.05，＊＊P＜0.01，＊＊＊P＜0.001comparedwithinfantgroup图3增龄恒河猴外周血白细胞中miＲ-16-5p靶基因的验证Fig3DetectionofmiＲ-16-5ptargetgenesinleukocytesofagingrhesusmonkeys(x±s，n=6)计学意义，可能是由于APP还受其他因素调节。根据对19条mＲNA的验证结果发现PIK3Ｒ1、IＲS1和IKBKB很可能是miＲ-16-5p在外周血白细胞中的靶基因，分别与胰岛素信号通路及NFκB信号传导相关。胰岛素通路是调节糖代谢的重要通路，可以通过其受体IＲ及其受体底物IＲS激活PI-3K/AKT信号通路来发挥功能。IＲS1的缺失可以延长小鼠的寿命［9］，其在脑部的异位磷酸化也与APP的异常聚集有关［10］。说明胰岛素通路与衰老有关，具体则可能是通过PI-3K/AKT通路及叉头转录因子(FoxO)完成的。FoxO能被AKT磷酸化后离开细胞核进入到泛素降解途径。而FoxO在核内可以与转录因子共同激活其基因的表达，通过保护机体免受氧化应激侵扰［11］，增加受损蛋白的移除［12］999


本文编号：3027278