祛风活血丸对EAU大鼠模型房水白细胞计数和TGF-β2表达影响的研究

发布时间：2017-04-13 05:00

  本文关键词：祛风活血丸对EAU大鼠模型房水白细胞计数和TGF-β2表达影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过观察实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis,EAU)大鼠的眼部症状及体征改变情况,以房水白细胞计数、葡萄膜TGF-β2表达为观察指标,客观评价祛风活血丸的治疗效果,并探讨白细胞、TGF-β2在葡萄膜炎发生发展过程中的作用。方法:1、EAU模型建立:SPF级Lewis大鼠60只,右后足垫下注射IRBP混合乳剂建立实验性自身免疫性葡萄膜炎模型,空白对照组10只,右后足垫下注射无菌生理盐水;2、祛风活血丸治疗:将造模成功的55只大鼠分为5组,即模型对照组、祛风活血丸低剂量组、祛风活血丸中剂量组、祛风活血丸高剂量组、阳性对照组,祛风活血丸低、中、高剂量组分别予以不同剂量祛风活血丸灌胃,阳性对照组予以熊胆开明片灌胃,模型对照组及空白对照组予以生理盐水灌胃,观察大鼠眼部的表达情况;3.分别于灌胃后第7天、14天、21天、28天分批处死,取房水涂片检测白细胞计数,并以免疫组织法检测中葡萄膜中TGF-β2表达。结果:1.成功诱发Lewis大鼠的EAU模型,诱发成功率为91.7%,免疫5d后开始出现葡萄膜炎症状,第14d达到高峰,炎症反应剧烈;2.房水白细胞计数:造模后与空白对照组相比,模型对照组均有明显统计学差异(P0.01);药物治疗后大鼠房水白细胞计数明显降低,其中以中、高剂量组最为明显,各时间段均有明显统计学差异(P0.01);低剂量组于给药后第7天及第14天无明显统计学差异(P0.05),至给药第21天,有明显统计学差异(P0.01);阳性对照组于给药后第14天有明显统计学差异(P0.01);3:葡萄膜TGF-β2表达:造模后与空白对照组相比,模型对照组均有明显统计学差异(P0.01);药物治疗后大鼠葡萄膜TGF-β2含量明显降低,其中以中、高剂量组最为明显,各时间段均有明显统计学差异(P0.01);低剂量组于给药后第7天有明显统计学差异(P0.01),第21天有统计学差异(P0.05),第14天及第28天无明显统计学差异(P0.05);阳性对照组于给药后第14天及第21天有明显统计学差异(P0.01),第7天及第28天有统计学差异(P0.05)。4.未经药物干预的EAU大鼠房水白细胞数及葡萄膜TGF-β2表达于炎症高峰期增多,炎症消退期下降,这可能与机体自主调节自身免疫功能相关。结论:1.用IRBP抗原右足后垫下注射可诱发EAU模型;2.祛风活血丸治疗EAU模型有效,灌胃后大鼠房水白细胞计数及葡萄膜TGF-β2表达明显降低,至给药后28天左右基本消失,药物治疗有效,其中中剂量组与高剂量组对比治疗效果无明显差异,但中、高剂量组治疗效果皆优于低剂量组及阳性对照组。说明祛风活血丸能有效减轻前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部结构进一步损害,调节免疫状态,对葡萄膜炎发挥治疗作用。
【关键词】：祛风活血丸 实验性自身免疫性葡萄膜炎 房水 白细胞计数 TGF-β_2
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R276.7;R-332
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 缩略语／符号说明9-10
• 引言10-12
• 第一部分 材料与方法12-16
• 1 实验材料12-13
• 1.1 实验动物12
• 1.2 实验试剂与仪器12-13
• 1.3 实验用药13
• 2 实验方法13-14
• 2.1 EAU模型建立13
• 2.2 动物分组13-14
• 2.3 灌胃14
• 2.4 观察及记录14
• 3 取材及检测14-16
• 3.1 取材14-15
• 3.1.1 取房水14-15
• 3.1.2 取眼球15
• 3.2 检测15-16
• 3.2.1 房水涂片检测白细胞计数15
• 3.2.2 免疫组织化学法检测葡萄膜中TGF-β_2的表达15-16
• 4 统计分析16
• 第二部分 结果与分析16-23
• 1 造模结果16-17
• 2 造模临床评分比较17-18
• 3 显微镜下大鼠房水白细胞计数18-19
• 4 葡萄膜TGF-β_2表达的测定与分析19-23
• 第三部分 讨论23-29
• 1 EAU动物模型的建立23-24
• 2 白细胞在葡萄膜炎发病中的作用24
• 3 TGF-β_2在葡萄膜炎发病中的作用24-25
• 4 西医学对葡萄膜炎的认识25-26
• 5 中医学对葡萄膜炎的认识26-28
• 6 问题与展望28-29
• 结论29-30
• 致谢30-31
• 参考文献31-33
• 附件：文献综述 相关细胞因子在葡萄膜炎发病机制中的作用33-41
• 参考文献38-41

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