马尔尼菲青霉菌随机扩增多态性分析

发布时间：2021-02-21 22:54

　　目的 研究马尔尼菲青霉菌（PM）的基因多态性，进行PM的基因分型。方法 采用氯化苄提取法提取基因组DNA。用随机扩增多态性DNA （RAPD）技术对12株临床分离的PM菌株进行了DNA指纹图谱分析。结果 ①共选用40个随机引物进行扩增，筛选出4个具有稳定、清晰DNA扩增带型的引物。即引物P23：5＇-AGTCAGCCAC -3＇，P103：5＇-AGACGTCCAC -3＇，P105：5＇-AGTCGTCCCC- 3＇，P120：5＇-GGGAGACATC -3＇。②12株菌株RAPD-PCR图谱主要带型相同,扩增片段呈多态性。相似率44.4%～97.3%。③12株PM菌可分5型。结论 12株来源于不同地区马尔尼菲青霉菌病（PsM）病人的PM（菌丝相）,采用RAPD-PCR得到的DNA图谱呈多态性，并分为5型。对今后进一步研究PM的流行病学及防治均具有指导意义。 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

沙氏琼脂培养基培养的PM（有色素）

均不显任何条带。结 果. PM 的培养.1 12 株 PM 分别接种于沙氏琼脂培养基后置于 25℃及 37培养箱中培养。7、8、11、12 号 PM 在 25℃下三天后长白色、淡黄色绒状菌落，并可见玫瑰红色的色素溶于培养中。10 天后培养基全部变为玫瑰红色，有绒状气中菌丝。见图 1）其余 8 株 PM 因转代较多无玫瑰红色的色素产生见图 2）。

图 3 引物 P105 所扩增带型 从左到右：Marker：分子量标准对照，1-12 为 12 株 PM。从左到右：M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 M 1 图 5 引物 P103 所扩增带型 从左到右：Marker：分子量标准对照，1-12 为 12 株 PM 从左到右：PM。

【参考文献】：
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本文编号：3045042