UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞固有免疫炎症信号通路TLR4-IRF3的影响

发布时间：2021-02-21 22:09

　　目的:探讨urotensin Ⅱ（UⅡ）/UT系统对脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激枯否细胞（Kupffer cell,KC）固有免疫炎症信号通路Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）-干扰素调节因子3（Interferon regulatory factor 3,IRF3）的影响。方法:采用在体原位灌注、密度梯度离心和早期细胞换液等方法分离纯化大鼠KC,并采用墨汁吞噬和ED2染色试验对分离培养的细胞进行鉴定。采用LPS刺激肝KC。将细胞按照随机数字表的方法随机分成6组,各组细胞处置方法如下:A组:UⅡ（-）urantide（-）LPS（-）;B组:UⅡ（+）urantide（-）LPS（-）;C组:UⅡ（-）urantide（+）LPS（-）;D组:UⅡ（-）urantide（-）LPS（+）;E组:UⅡ（+）urantide（-）LPS（+）;F组:UⅡ（-）urantide（+）LPS（+）。KC培养上清液促炎性细胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析检测,细胞表面TLR4的表达采用流式细胞技术分... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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缩略词表
摘要
ABSTRACT
引言
材料与方法
    1.原代肝枯否细胞的分离和培养
    2.枯否细胞吞噬功能鉴定（墨汁吞噬试验）
    3.细胞免疫化学染色（ED2染色）
    4.大鼠原代肝枯否细胞分组处理
    5.酶联免疫吸附分析
    6.实时荧光定量PCR
    7.流式细胞技术
    8.细胞浆/核蛋白的抽提
    9.蛋白质的样品准备和浓度测定
    10.免疫印迹（Western blot）
    11.统计学分析
结果
    1.原代枯否细胞分离培养结果
    2.吞墨实验
    3.原代枯否细胞ED2染色结果
    4.UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞促炎细胞因子IL-6、IFN-β和 IFN-γ分泌的影响
    5.UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞TRL4 表达的影响
    6.UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞IRF3 mRNA表达的影响
    7.UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞IRF3 蛋白表达的影响
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
攻读学位期间发表的文章和参加的课题
致谢



本文编号：3044995