含可调控人胰岛素原基因质粒的包装增殖及鉴定

发布时间：2021-02-26 13:25

　　目的 T1DM是一种自身免疫性疾病，现在的治疗手段主要是注射外源胰岛素或胰腺（胰岛）移植来维持正常的血糖水平。但是这两种方法均存在不可避免的缺点。随着分子生物学技术的发展，转基因技术在克服了技术问题，道德伦理问题和调控机制的人工操作问题后，将成为T1DM治疗的最佳选择。T1DM的转基因治疗目前仍处于试验阶段，其基本过程分以下六个步骤：（1）人胰岛素原基因的获取；（2）连接调控元件并与载体连接；（3）重组质粒导入包装细胞；（4）筛选出含重组DNA分子的受体细胞克隆；（5）克隆基因的表达及表达产物的检测与分离纯化；（6）动物实验。本实验在重组质粒已经构建成功的基础上，主要进行第（3）、（4）步操作，即将含人胰岛素原基因（其上游连接有两个调控元件：LPK基因启动子中的GIBE和IC-FBP-1基因启动子）的逆转录病毒载体导入PA317包装细胞系，并采用NIH3T3细胞测定病毒滴度，筛选出一株高效特异的产病毒细胞克隆，为下一步的细胞水平和动物水平实验打下基础。从而为同类试验探索出一条成熟的技术路线。 方法 本试验根据前试验所采用的逆转录病毒载体P^LXSN... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：35 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 英文缩略语
四、 论文主体
    1 前言
    2 实验材料
    3 实验结果（附表附图）
    4 讨论
    5 结论
五、 本研究新见解
六、 参考文献
七、 致谢
八、 综述
九、 个人简介
十、 在学期间发表论文、获奖等题目



本文编号：3052649