结核分枝杆菌Rv2673基因过表达对分枝杆菌细胞壁组分的影响

发布时间：2021-02-28 01:26

　　目的分析结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）Rv2673基因过表达对分枝杆菌细胞壁组分的影响。方法构建Rv2673在耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis,Msm）中的表达载体,导入到Msm后提取膜蛋白,以抗组胺酸标签的单克隆抗体鉴定表达的Rv2673蛋白。细菌培养时加入¹⁴C-葡萄糖,收获Msm后分别以氯仿∶甲醇（2∶1）、氯仿∶甲醇∶水（10∶10∶3）、ε-soak-lovolunnee试剂分步提取全细胞的细胞壁组分,其余的沉淀则用以提取LAM。以HP-TLC及SDS-PAGE方法分离提取的组分,放射自显影。结果生物信息学分析表明Rv2673蛋白为在羧基末端具有8次跨膜结构的膜蛋白;Western bloting方法检测到过表达Rv2673的菌株膜蛋白中具有表达的Rv2673蛋白。TLC方法对细胞壁组分的分步分析表明过表达Rv2673的菌株及其对照菌株间DPA、DPM、Ac2PIM2、AcPIM2和Ac2PIM4/AcPIM4等小分子脂溶性分子没有显著性差异,但Western blot分析的细胞壁... 

【文章来源】：中国病原生物学杂志. 2019,14(03)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 结核分枝杆菌
        2.2 膜蛋白提取
        2.3 Western blot分析
        2.4 含有pVV2-Rv2673表达载体的Msm细胞壁组分的提取
        2.5 统计学方法
结 果
    1 Rv2673蛋白预测
    2 Rv2673膜蛋白在Msm中的表达
    3 高表达Rv2673的Msm细胞壁组分的差异性
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]细粒棘球绦虫EgM123重组耻垢分枝杆菌疫苗在小鼠体内的表达及其免疫应答[J]. 何黎,齐文静,郑雪婷,郭刚,李军,张文宝.  中国病原生物学杂志. 2018(12)
[2]分枝杆菌细胞壁聚阿拉伯甘露糖脂的结构、合成过程及免疫调节[J]. 李雅琼,张文利,董旭.  中华微生物学和免疫学杂志. 2010 (09)



本文编号：3055100