rhNDPK-A蛋白结构特征研究及若干免疫学作用初探

发布时间：2021-03-03 12:40

　　目的：通过对重组人rhNDPK-A的蛋白结构及生物学特性的研究，为进一步研究其生物学功能提供理论基础，探讨rhNDPK-A蛋白对免疫细胞的作用，为深入研究rhNDPK-A蛋白对免疫系统的作用机理提供理论基础。 方法：在纯化rhNDPK-A蛋白的基础上，对其单体分子量、酶活性、蛋白纯度及聚集体分子量进行了测定，聚集体分子量的测定采用了HPLC和多角激光仪，并用原子力显微镜对rhNDPK-A聚集体的外部形貌进行了观察。rhNDPK-A蛋白体外作用于正常小鼠的脾细胞，用MTT法测定了rhNDPK-A蛋白对小鼠脾细胞存活的影响以及对有丝分裂原诱导的脾细胞增殖的协同作用，用流式细胞仪测定了rhNDPK-A蛋白对脾细胞的细胞周期的影响。以纯化得到的rhNDPK-A蛋白免疫新西兰兔，蛋白免疫印迹实验鉴定了兔抗血清的特异性。 结果：1．纯化所得到的rhNDPK-A蛋白主要是以六聚体的形式存在；2．rhNDPK-A蛋白体外作用，可直接促进小鼠的脾细胞存活，并对PHA、ConA诱导的脾细胞增殖有协同作用；3．rhNDPK-A蛋白可明显改变脾细胞的细胞周期。3．免疫得到的兔抗血清具有较好的特异性... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 nm23的研究进展及研究目的
    一、 NDPK蛋白的结构特征
    二、 NDPK蛋白的分布
    三、 NDPK蛋白的生物学功能
    四. 本研究的目的和意义
第二部分 rhNDPK-A蛋白的结构研究
    一、 实验材料
    二、 实验方法和步骤
        （一） rhNDPK-A蛋白的分离纯化
        （二） rhNDPK-A蛋白亚基的分子量测定--SDS-PAGE
        （三） rhNDPK-A蛋白含量测定--Bradford法
        （四） rhNDPK-A蛋白的酶活性测定
        （五） rhNDPK-A蛋白的纯度测定--RP-HPLC
        （六） rhNDPK-A蛋白的聚集体分子量测定
        （七） 原子力显微镜（AFM）扫描rhNDPK-A的外部形貌
    三、 实验结果
        （一） rhNDPK-A蛋白的亚基分子量
        （二） rhNDPK-A的蛋白含量
        （三） rhNDPK-A蛋白的酶活性
        （四） rhNDPK-A蛋白的纯度测定
        （五） rhNDPK-A蛋白的聚集体的分子量测定
        （六） AFM对rhNDPK-A外部形貌的观察结果
    四、 讨论
第三部分 rhNDPK-A蛋白的免疫学作用初探
    一、 实验材料
    二、 实验方法和步骤
        （一） rhNDPK-A蛋白对正常小鼠脾细胞的作用
        （二） rhNDPK-A蛋白的抗血清制备
    三、 实验结果
        （一） rhNDPK-A蛋白对正常小鼠脾细胞的作用
        （二） rhNDPK-A蛋白抗血清的制备及其意义
    四、 讨论
        （一） rhNDPK-A蛋白对小鼠脾细胞存活和细胞周期的影响
        （二） rhNDPK-A蛋白对有丝分裂原诱导的脾细胞增殖的影响
        （三） rhNDPK-A蛋白抗血清的制备及其意义
小结
参考文献
英文缩略语表
致谢
附: 在学期间发表文章


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3061279