转JAK2基因调控的多潜能造血干/祖细胞体外长期扩增及定向分化实验研究

发布时间：2021-03-05 18:25

　　背景造血干细胞具有自我更新和定向分化为多系成熟血细胞的能力，进行干细胞扩增一直是科学家们研究的热点。大量的研究显示，在不同细胞因子组合条件下所进行的悬浮和贴壁扩增培养体系并未获得大量干细胞，而且存在扩增时间短等等诸多问题。众所周知，许多细胞的关键功能，比如细胞分裂分化成为特定细胞、对刺激因子的应答，甚至细胞死亡，都是通过细胞的信号和基因活化来完成的。多年来的研究证实“二聚化”是细胞内外蛋白活化中信号转导通路的核心，是细胞分子生物学中的一般机理。当两个蛋白发生二聚化，信号转导就被激活。根据这些分子生物学机制，开发了基因调控表达技术，通过利用小分子化合物来控制细胞的生长，使细胞的特定信号激活或转录成为可能。最近研究已经证实，JAKs-STATs信号转导通路在干细胞的自我更新中扮演着重要的作用，而且大多数细胞因子又是通过JAKs-STATs来传递信号的。JAK2是JAK家族的重要成员，在干／祖细胞的自我更新中又起着重要的枢纽性作用。因此，我们构建克隆了一个以MSCV-Based的逆转录病毒载体，内含有JAK2的功能信号区域和两个对二聚化化学诱导物（AP20187）有高度亲和力的结合位点（F3... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MTT比色法测定细胞增殖反应曲线

天数图1细胞增殖反应曲线NoGF(growtllfactor)组、APZo187组、KL(sCF)组、细胞在l周至1月左右死亡;只有AP20187十KL组、AP2087+KL+FL组可以持续使造血细胞扩增。FL组、KL+FLAP20187+FL组

图6.ASF细胞表型Seal阳性细胞为52一98%、ckit阳性细胞为56~69%、CD3胞为4小85%、TER119阳性为0一20%、CD41阳性为5一36%约12~46%、Grl阳性率卜17%、CD1lb为35碑6%和C性。


本文编号：3065654