抗NI-35重组单链抗体表达载体的构建与初步表达

发布时间：2021-03-09 07:13

　　目的 近年来关于神经再生特别是中枢神经系统（CNS）损伤后再生的研究，一直是神经解剖学、神经生物学和神经免疫学等神经科学的研究热点。最新的研究结果揭示，哺乳动物成熟个体表现出的CNS再生能力缺乏并不是因为CNS自身不具有再生能力，而是这种能力被某种物质所强烈地抑制。目前认为这种再生抑制物质是由少突胶质细胞等分泌的一类髓鞘质蛋白，其中分子量为35，000dal的NI-35是目前所知的抑制再生能力V_H最强的一种蛋白因子。已有大量研究证实，在离体细胞实验和动物实验中应用抗NI-35的单克隆抗体对NI-35进行封闭，都使CNS再生获得了成功。本实验的目的是应用分子克隆技术，将已知的抗鼠NI-35单克隆抗体的重链可变区V_H和轻链可变区V_L基因进行重组，使二者通过一个由四个甘氨酸一个丝氨酸组成的重复序列短肽连接，构建出一种全新的抗NI-35重组单链抗体（anti-NI-35scFv），并使其在大肠杆菌中初步表达。 方法 从genebank中检索抗NI-35单克隆抗体（anti-NI-35mAb）重链可变区和轻链可变... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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图5pET-28a(+)一anti一NI一35seFv菌落PCR鉴定结果M:DNAMarkerl:空载体pE下28a(+)对照2一8:PET-28a(+)一anti一NI一35scFv菌落PCR产物M

图6pET-Zsa(+)一anti一M一35SeFv双酶切鉴定结果:DNAMarker3:提纯的重组子pET-28a(+)一anti一Nx一35seF:经BamHI和Hind111双酶切的质粒pET-28a(+)一anti一Nx一35sel7


本文编号：3072480