结缔组织生长因子诱导人增生性瘢痕成纤维细胞转分化的研究

发布时间：2021-03-07 23:39

　　目的:目前实验研究表明,病理性瘢痕的形成可能是成纤维细胞向肌成纤维细胞（MyoF）转分化,并且后者持续存在的结果。转化生长因子-β1（TGF-β1）被认为是促进纤维化发展的最重要的生长因子,具有促进成纤维细胞分化的作用,但阻断其表达而带来的负作用也异常明显,结缔组织生长因子（CTGF）于1991年发现,被认为是TGF-β1的下游效应因子,主要在间质细胞中表达,是一种特异性更强的促纤维化因子,本文旨在探讨结缔组织生长因子是否也具有促进瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的作用,且与TGF-β1之间的关系如何,为增生性瘢痕（HS）的防治研究拓展新的领域。方法:原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）,分别向其培养基内单独或同时加入不同浓度的TGF-β1和CTGF,通过CTGF反义寡核苷酸转染,以及先转染后再加入TGF-β1刺激,使用倒置显微镜、免疫细胞化学、Western-blot、流式细胞术等方法对人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞形态及表型的转变进行评估。结果:不同浓度CTGF及TGF-β1作用48h后,各浓度组HSF细胞形态均呈现出不同程度的改变,其中以CTGF和TGF-β1联合刺激... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CTGF浓度与α－SMA蛋白表达的变化

图 2 TGF-β1浓度对 CTGF 蛋白表达的影响、不同浓度 TGF-β1对α－SMA 蛋白表达的影响述样本同样经 Western－blot 检测，结果分析发现，TGF-β1的浓度与α达之间的关系与 CTGF 组结果类似，正常人增生性瘢痕成纤维细胞表达 蛋白，在加入不同浓度 TGF-β1后(2.5 ng/ml、5 ng/ml、7.5ng/ml、10 ml)，α－SMA 蛋白的表达量呈逐渐上升趋势，与对照组相比差异显著，1的浓度为 10ng/ml 时，这种作用最为明显(p<0.05)。(见表 2，图 2，照 TGF-β1浓度为 10 ng/ml 刺激 HSF，48h 后行流式细胞术检测，结果显－SMA 阳性细胞百分率为 10.76±2.81％，TGF-β1刺激组α－SMA 阳为 28.74±4.75％，与对照组相比差异显著（P<0.05）(见表 5，图 5)。

第三军医大学硕士学位论文表 3 TGF-β1浓度与α－SMA 蛋白表达的变化(目的蛋白/内参蛋白， x ±s)组别 标本数 目的蛋白和内参蛋白平均光密度(OD)×面积(mm2)的比值对照组 6 0.36±0.14T2.5ng/ml组 6 0.44±0.09T5ng/ml组 6 0.44±0.12*T7.5ng/ml组 6 0.56±0.09*T10ng/ml组 6 0.79±0.15*T20ng/ml组 6 0.80±0.17*△*：与对照组相比：P<0.05△：与 T10ng/ml组相比：P>0.05

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3070012