HCMV先天性潜伏感染Balb/c老年小鼠IRP与AD样病理改变的相关性研究
发布时间：2021-03-27 12:31
目的在已建立的HCMV先天性中枢神经系统潜伏感染Balb/c老年小鼠模型的基础上,评价老年模型小鼠的免疫风险表型（IRP）,同时观察大脑皮质的阿尔茨海默病（AD）样病理改变,初步探讨HCMV先天性潜伏感染老年Balb/c小鼠免疫功能改变与AD发生发展的相关性。方法随机选取HCMV先天性潜伏感染组（A组）、HCMV先天性潜伏感染再激活组（B组）及HF细胞对照组（C组）2426月龄老年雌性小鼠各6只,眼眶取血并引颈处死后,无菌取小鼠大脑皮质和脾脏,分别作如下试验:（1）体外细胞共培养病毒分离试验、PCR及原位杂交检测HCMV UL83 DNA、RT-PCR检测HCMV UL83 mRNA、间接免疫荧光检测HCMV pp65等确定三组小鼠脑组织中HCMV感染及其感染状态;（2）小鼠免疫状态检测:间接ELISA检测小鼠血清中的HCMVIgG、IgM抗体水平,流式细胞仪分别检测外周血细胞和脾脏细胞悬液中CD3+/CD4+/CD8+ T淋巴细胞亚群数量;（3）大脑皮质AD相关病理学检测:HE染色检测小鼠大脑皮质构筑和病理改变;刚果红染色检测大脑皮质中的淀粉样斑块;镀银染色检查...
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
共培养病毒分离试验HF细胞CPE改变(×200)
图 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 琼脂糖凝胶电泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCR:DL-2000 Marke； 1:阳性对照；2:阴性对照 3:A 组小鼠；4:B 组小鼠；5:C 组小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C;接免疫荧光检测 pp65 抗原结果HCMV pp65多克隆抗体进行免疫荧光检测各组细胞爬片pp65抗原的表达情在 A、B 两组的 HF 细胞浆内检测到苹果绿色阳性信号（图 3-Ⅱ）；C 组未检特异性苹果绿色荧光阳性信号（图 3-Ⅰ）。
图 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 琼脂糖凝胶电泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCRM:DL-2000 Marke； 1:阳性对照；2:阴性对照 3:A 组小鼠；4:B 组小鼠；5:C 组小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C; 间接免疫荧光检测 pp65 抗原结果用HCMV pp65多克隆抗体进行免疫荧光检测各组细胞爬片pp65抗原的表达情在 A、B 两组的 HF 细胞浆内检测到苹果绿色阳性信号（图 3-Ⅱ）；C 组未检特异性苹果绿色荧光阳性信号（图 3-Ⅰ）。250100005000PCR RT-PCR
【参考文献】：
期刊论文
[1]老年斑、神经元纤维缠结与硫酸多糖[J]. 胡金凤,耿美玉. 中国药理学通报. 2003(01)
[2]Alzheimer病病人血清与脑脊液白细胞介素-1及肿瘤坏死因子水平检测的研究[J]. 王琳,韩杰,张昱. 中华神经科杂志. 2002(06)
[3]人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立[J]. 王明丽,唐久来,胡闻,史百芬,胡勇,毕克菊,李京培. 动物学报. 2000(02)
[4]孕期巨细胞病毒感染的免疫学变化[J]. 闫凤亭,李芬. 国外医学.妇幼保健分册. 2000(01)
[5]新生乳鼠大脑神经胶质细胞对人巨细胞病毒易患性研究[J]. 王明丽,胡闻,李京培,史百芬,胡勇,任斌,唐久来. 中华神经科杂志. 1999(05)
[6]人巨细胞病毒感染新生乳鼠原代培养脑神经细胞研究[J]. 王明丽,陈贵海,唐久来,史百芬,胡勇,汪红俊,李京培,任斌. 病毒学报. 1999(02)
[7]反复呼吸道感染患儿巨细胞病毒感染与细胞免疫功能关系的探讨[J]. 李亚蕊,白翠莲,刘秀萍,李润森,贾旭林. 中国免疫学杂志. 1997(03)
[8]神经退行性变的免疫学机制[J]. 赵红卫,McGeerPL. 国外医学.药学分册. 1997(02)
本文编号：3103518
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
共培养病毒分离试验HF细胞CPE改变(×200)
图 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 琼脂糖凝胶电泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCR:DL-2000 Marke； 1:阳性对照；2:阴性对照 3:A 组小鼠；4:B 组小鼠；5:C 组小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C;接免疫荧光检测 pp65 抗原结果HCMV pp65多克隆抗体进行免疫荧光检测各组细胞爬片pp65抗原的表达情在 A、B 两组的 HF 细胞浆内检测到苹果绿色阳性信号（图 3-Ⅱ）；C 组未检特异性苹果绿色荧光阳性信号（图 3-Ⅰ）。
图 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 琼脂糖凝胶电泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCRM:DL-2000 Marke； 1:阳性对照；2:阴性对照 3:A 组小鼠；4:B 组小鼠；5:C 组小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C; 间接免疫荧光检测 pp65 抗原结果用HCMV pp65多克隆抗体进行免疫荧光检测各组细胞爬片pp65抗原的表达情在 A、B 两组的 HF 细胞浆内检测到苹果绿色阳性信号（图 3-Ⅱ）；C 组未检特异性苹果绿色荧光阳性信号（图 3-Ⅰ）。250100005000PCR RT-PCR
【参考文献】：
期刊论文
[1]老年斑、神经元纤维缠结与硫酸多糖[J]. 胡金凤,耿美玉. 中国药理学通报. 2003(01)
[2]Alzheimer病病人血清与脑脊液白细胞介素-1及肿瘤坏死因子水平检测的研究[J]. 王琳,韩杰,张昱. 中华神经科杂志. 2002(06)
[3]人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立[J]. 王明丽,唐久来,胡闻,史百芬,胡勇,毕克菊,李京培. 动物学报. 2000(02)
[4]孕期巨细胞病毒感染的免疫学变化[J]. 闫凤亭,李芬. 国外医学.妇幼保健分册. 2000(01)
[5]新生乳鼠大脑神经胶质细胞对人巨细胞病毒易患性研究[J]. 王明丽,胡闻,李京培,史百芬,胡勇,任斌,唐久来. 中华神经科杂志. 1999(05)
[6]人巨细胞病毒感染新生乳鼠原代培养脑神经细胞研究[J]. 王明丽,陈贵海,唐久来,史百芬,胡勇,汪红俊,李京培,任斌. 病毒学报. 1999(02)
[7]反复呼吸道感染患儿巨细胞病毒感染与细胞免疫功能关系的探讨[J]. 李亚蕊,白翠莲,刘秀萍,李润森,贾旭林. 中国免疫学杂志. 1997(03)
[8]神经退行性变的免疫学机制[J]. 赵红卫,McGeerPL. 国外医学.药学分册. 1997(02)
本文编号：3103518
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