人胚胎干细胞源神经球条件培养液对大鼠施万细胞增殖和迁移的影响

发布时间：2021-04-21 00:20

　　目的:探讨人胚胎干细胞源神经球条件培养液（human embryonic stem cell-derived neurospheres conditioned medium,h ESCN-CM）对施万细胞增殖和迁移的影响及其潜在的机制。方法:取3～5 d SD大鼠双侧坐骨神经,分离纯化施万细胞,用免疫荧光染色法进行鉴定。分别用0%、50%和100%h ESCN-CM刺激施万细胞,CCK-8实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,实时荧光定量PCR检测Nt3、Vegf、Ngf、Bfgf、Igf-1等mRNA的表达。结果:免疫荧光染色结果显示,施万细胞S100特异性表达可达99%。CCK-8实验显示,与0%h ESCN-CM相比,50%h ESCN-CM刺激后施万细胞增殖明显增强,100%h ESCN-CM刺激后施万细胞增殖明显降低（P均<0. 05）。划痕实验显示,刺激6 h,与0%h ESCN-CM刺激后施万细胞相比,50%和100%h ESCN-CM刺激后施万细胞迁移明显增强（P <0. 05）;刺激12 h,50%h ESCN-CM刺激后施万细胞迁移明显增强（P <... 

【文章来源】：江苏大学学报(医学版). 2019,29(03)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 原代施万细胞的分离纯化
    1.3 免疫荧光染色检测施万细胞特定蛋白的表达
    1.4 人胚胎干细胞源神经球的培养
    1.5 h ESCN-CM的制备
    1.6 CCK-8实验检测细胞增殖活性
    1.7 划痕实验检测细胞迁移
    1.8 实时荧光定量PCR （qRT-PCR） 检测施万细胞多种mRNA表达
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 大鼠施万细胞形态和鉴定
    2.2 hESCN-CM对施万细胞增殖能力的影响
    2.3 h ESCN-CM对施万细胞迁移能力的影响
    2.4 hESCN-CM对施万细胞多种细胞因子表达的影响
3 讨论



本文编号：3150680