PCR结合酶切分析鉴别疱疹病毒科四种病毒感染研究

发布时间：2021-04-25 11:16

　　用DNAstar软件包分别从HCMV、HSV-1、HSV-2和EBV的DNA聚合酶高保守基因区中设计一对共享序列引物，根据四种基因产物序列选择Sma I 和 BamH I作为限制性内切酶，对PCR产物进行酶切，从而做到在一个方法中，经一次PCR扩增并结合酶切即可区分四种病毒的感染。应用这一方法，分别检测了临床高危感染者血标本、孕期可疑宫颈分泌物和尿配对标本共99例，四种病毒扩增的产物分别是HCMV 594bp、HSV-1与 HSV-2均为522bp、EBV 528bp。HSV-1被SmaI酶切形成478和44 bp两个片段，但没有BamH I酶切位点；HSV-2被BamH I酶切后形成224和298bp两个片段，没有SmaI酶切位点；EBV各有一个SmaI和 BamH 酶切位点，分别切成101与427，246和282bp 四个片段；HCMV没有两种酶切位点。经Southern印记、CC法金标准对比、原位杂交和与单一四种PCR试剂进行了验证和评估，结果表明，单一PCR试剂盒和共享引物PCR酶切两种试剂的检测敏感性无明显的差异（X2 =0.29, P>0.05），符合率达85.7%。... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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前 言
材料与方法
结 果
讨 论
小 结
附 表
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致 谢
综 述
"><参考文献>



本文编号：3159289