PI3K/AKT信号通路的抑制促进B7-H4分子的核转移

发布时间：2021-05-09 04:24

　　目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路对负性共刺激分子B7-H4细胞定位的调控作用。方法体外培养稳定转染B7-H4/HEK293细胞,采用PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002和/或出核转运抑制剂来普霉素B（LMB）处理细胞之后,免疫荧光技术结合激光共聚焦显微镜检测B7-H4蛋白在B7-H4/HEK293细胞中亚细胞定位的变化;Western20blot法检测B7-H4蛋白在细胞膜、细胞质和细胞核表达水平的变化。结果激光共聚焦显微镜观察结果显示,PI3K抑制剂LY294002作用于B7-H4稳定转染的B7-H4/HEK293细胞后,与空白对照组相比,B7-H4发生核转移,加入出核转运抑制剂LMB后,核转移的程度显著增加;Western20blot法结果显示,LY294002抑制PI3K/AKT信号通路活性2420h后,B7-H4在细胞膜和细胞质中的定位均显著降低（P<0.05）,而细胞核中B7-H4的定位显著增加（P<0.05）。结论20PI3K/AKT信号通路可抑制B7-H4的核转移。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2014,30(11)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1细胞培养和分组
        1.2.2免疫荧光技术检测B7-H4在B7-H4/HEK293细胞的表达
        1.2.3 Western blot法检测B7-H4在B7-H4/HEK293细胞的表达
        1.2.4统计学分析
2 结果
    2.1 LY294002和LMB作用浓度和时间的确定
    2.2 免疫荧光检测细胞中B7-H4的定位
    2.3 Western blot法检测LY294002处理前后B7-H4总蛋白量
    2.4 Western blot法检测LY294002处理前后B7-H4在细胞内定位的变化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]B7家族PD-L1和B7-H4的研究进展[J]. 王辉,田波,鲁常青.  细胞与分子免疫学杂志. 2013(02)



本文编号：3176619