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Sulfiredoxin-1对星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧损伤的保护作用

发布时间:2021-05-10 01:45
  目的探讨Sulfiredoxin-1(Srxn1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose20deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的星形胶质细胞损伤的保护作用。方法201应用RNAi技术将Srxn1干扰小发夹RNA(shRNA)及阴性载体(negative20control)转染至星形胶质细胞,Real-time20quantitative20PCR(QPCR)和Western20blot检测转染后Srxn1的基因和蛋白表达水平;2实验分为control组、control+OGD/R组、negative20control(NC)+OGD/R组、sh-Srxn1+OGD/R组(n=3),细胞转染7220h后建立OGD模型,620h后予以复氧,模拟再灌注模型;3复氧1220h后,MTS法检测细胞活性,Hoechst2033342检测细胞凋亡率,Western20blot检测细胞Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果201shRNA-Srxn1转染细胞后,与空白组和阴性组比较,干扰组Srxn120mRNA及蛋白表达水平明显降低,分别降低47%和58.5%... 

【文章来源】:第三军医大学学报. 2014,36(21)北大核心CSCD

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 主要试剂
    1.2 星形胶质细胞的原代培养
    1.3 星形胶质细胞的转染
    1.4 实验分组及设计
    1.5 氧糖剥夺/复氧模型的建立
    1.6 q PCR检测Srxn1的mRNA表达水平
    1.7 Western blot检测Srxn1、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平
    1.8 MTS检测细胞活性
    1.9 GFAP/Hoechst 33342染色检测细胞纯度和凋亡情况
    1.1 0 统计学分析
2 结果
    2.1 大鼠星形胶质细胞纯度鉴定及转染效率鉴定
    2.2 Western blot和q PCR检测shRNA-Srxn1干扰效果
    2.3 Srxn1干扰对OGD/R损伤后细胞活性的影响
    2.4 Srxn1干扰对OGD/R损伤后细胞凋亡的影响
    2.5 Srxn1干扰对OGD/R损伤后Bcl-2和Bax表达的影响
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]Sulforaphane20protects20primary20cultures20of20cortical20neurons20against20injury20induced20by20oxygen-glucose20deprivation/reoxygenation20via20anti-apoptosis[J]. Xuemei Wu 1 , Jing Zhao 2 , Shanshan Yu 1 , Yanlin Chen 1 , Jingxian Wu 1 , Yong Zhao 1 1 Department of Pathology, 2 Department of Pathophysiology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China.  Neuroscience Bulletin. 2012(05)
[2]莱菔硫烷对神经元氧糖剥夺/复氧损伤的保护作用[J]. 吴雪梅,巫静娴,喻姗姗,赵敬,赵涌.  第三军医大学学报. 2011(18)



本文编号:3178433

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