SDF-1a对大鼠骨髓源CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+EPCs增殖、迁移等活性的影响
发布时间:2021-05-12 10:19
目的:本研究用一种杂交瘤皿,根据内皮祖细胞集落形成单位(endothelial progenitor cells colony-forming units,EPCs-CFUs)的形态特征和EPCs表面特异性标记物分离EPCs。方法:取大鼠股骨、胫骨骨髓,将全骨髓接种在聚苯乙烯材料的杂交瘤皿上,培养4-7天后出现干细胞集落单位(stem cells colony-forming units),在显微镜下将这些集落分别挑选出来后,取单个集落的一部分细胞,免疫荧光鉴定EPCs表面特异性标记物CD133/VEGFR-2。CD133/VEGFR-2双阳性即为EPCs-CFU。另一部分继续传代增殖,流式细胞术鉴定CD133/VEGFR-2/CD34。并把此方法定义为微孔法。结果:全骨髓接种后第4天,显微镜下可见明显的CFUs。免疫荧光鉴定7.33±2.51%(n=5)的CFUs为CD133+/VEGFR-2+ EPCs-CFUs,进一步传代培养,流式细胞术鉴定CD133/VEGFR-2双阳性率为73.28±7.43%, CD34/CD133双阳性率为70.36±10.17% (n=3)。传代细胞可...
【文章来源】:南华大学湖南省
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
主要缩略语英文索引
中文摘要
英文摘要
正文
引言
第一部分 大鼠骨髓源CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+EPCs的分离、纯化与鉴定
1. 材料与方法
2. 结果
2.1 大鼠骨髓EPCs 的形态特点
2.2 大鼠骨髓EPCs 的鉴定
3. 讨论
4. 小结
第二部分 SDF-1α 对 CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+ EPCs 增殖、迁移、黏附、血管样结构形成及凋亡的影响
1. 材料和方法
2. 结果
2.1 SDF-1α促进EPCs 增殖、迁移和黏附
2.2 SDF-1α促进EPCs血管样结构形成
2.3 SDF-1α对次级EPCs-CFUs数目和大小的影响
2.4 SDF-1α 抑制 Ox-LDL 致 EPCs 凋亡
2.5 流式细胞术检测细胞凋亡
2.6 SDF-1α 对 CXCR4 mRNA 和蛋白表达的影响
3. 讨论
4. 小结
结论
参考文献
综述
硕士期间已发表及拟发表的文章
致 谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]用CD133免疫磁珠分离脐血内皮祖细胞的实验研究[J]. 张威,周莉,金惠铭,曲晓义,张国平,殷莲华,朱大年. 中国病理生理杂志. 2005(09)
[2]趋化因子基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4[J]. 杨文博. 免疫学杂志. 2003(S1)
本文编号:3183240
【文章来源】:南华大学湖南省
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
主要缩略语英文索引
中文摘要
英文摘要
正文
引言
第一部分 大鼠骨髓源CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+EPCs的分离、纯化与鉴定
1. 材料与方法
2. 结果
2.1 大鼠骨髓EPCs 的形态特点
2.2 大鼠骨髓EPCs 的鉴定
3. 讨论
4. 小结
第二部分 SDF-1α 对 CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+ EPCs 增殖、迁移、黏附、血管样结构形成及凋亡的影响
1. 材料和方法
2. 结果
2.1 SDF-1α促进EPCs 增殖、迁移和黏附
2.2 SDF-1α促进EPCs血管样结构形成
2.3 SDF-1α对次级EPCs-CFUs数目和大小的影响
2.4 SDF-1α 抑制 Ox-LDL 致 EPCs 凋亡
2.5 流式细胞术检测细胞凋亡
2.6 SDF-1α 对 CXCR4 mRNA 和蛋白表达的影响
3. 讨论
4. 小结
结论
参考文献
综述
硕士期间已发表及拟发表的文章
致 谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]用CD133免疫磁珠分离脐血内皮祖细胞的实验研究[J]. 张威,周莉,金惠铭,曲晓义,张国平,殷莲华,朱大年. 中国病理生理杂志. 2005(09)
[2]趋化因子基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4[J]. 杨文博. 免疫学杂志. 2003(S1)
本文编号:3183240
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