旋毛虫5日龄成虫期特异性基因的克隆与表达

发布时间：2021-06-19 21:44

　　旋毛虫病是一种严重的人兽共患病，可感染人及150多种动物，呈世界性分布。近年来在我国17个省、市、自治区发现有多起人体感染的暴发流行。河南省为我国旋毛虫病高发区之一，仅郑州市已发生7次暴发流行，发病400多人。若不及时诊断和治疗，患者死亡率可高达3％～30％。因而旋毛虫成为我国肉食品卫生检验中的首检寄生虫，开展旋毛虫病的预防和控制工作在我国更具紧迫性和重要性，而预防和控制旋毛虫病的关键在于建立一套快速、简便、特异性高的检测手段以及采取各种有效预防措施降低动物感染率。 目前对旋毛虫病尚无满意的诊断方法，病原学检查检出率低且不易为患者接受。国内外学者对旋毛虫病的免疫学诊断进行了大量的研究，但所用的诊断抗原多为旋毛虫肌幼虫虫体粗抗原，由于抗原成分复杂，用于本病的免疫学诊断时常与其它寄生虫病发生交叉反应而出现假阳性。 对旋毛虫病的免疫预防的研究表明，由于旋毛虫在不同的发育期虫体抗原组分存在明显的差异且同一期虫体抗原结构也极其复杂，且在其长期的寄生生活中，逐渐形成了免疫逃避机制，目前采用成份复杂的虫体抗原往往难以取得理想的免疫预防效果且极不稳定，而且旋毛虫的体外培养仍未取得突破，这都... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ADS期特异性T

0.4kb一1.skb左右片段(见图3)。取1号、3号克隆切割获得噬菌体质粒后转染XLOLR宿主菌后，用通用测序引物T3、T7两端测序，结果显示3号克隆插入片段全长1132个碱基，插入片段位于ECoR工和Xhol之间，为一完整全长基因，其ORF位于2一1031bp之间，编码343个氨基酸、分子量为35.IkDa的多肤分子，测序及其编码氨基酸序列结果见图4。InterProSCan分析显示氨基

郑州口冤学2002年祠可士论文旋毛虫5日龄成虫期特异性堵‘因的分子克隆与表达门面面面面面面面面面面面面面面面DHSQ宿主菌后，长出50多个菌落，经kan+平板筛选，裂解液快速鉴定后，初步筛出6个菌落。任挑取1个筛出的菌落，小提质粒，BamH工和Xho工双酶切鉴定，应产生1164bp、5329bp片段。用Smal酶切应产生2387bp、4lO6bp片段。对照pET28a空载体用BamHI和Xhol双酶切，应产生5329bp片段。酶切鉴定结果见图10，与预期结果相符。

【参考文献】：
期刊论文
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[2]旋毛虫新生幼虫cDNA文库的构建[J]. 刘明远,付宝权,卢强,吴秀萍,姚春雨,宇丽,窦兰清,P.Boireau.  中国兽医科技. 2001(03)
[3]我国旋毛虫病流行病学概况与研究前瞻[J]. 刘明远.  中国农业大学学报. 1998(S2)
[4]中国旋毛虫分离株成虫和新生幼虫基因文库的构建及筛选[J]. 刘明远,徐克诚,黎诚耀,柳增善,孙远涛,赵君,郑明光.  中国兽医学报. 1998(02)
[5]旋毛虫肌幼虫ES抗原特异性蛋白2个结构基因的分子克隆及其高效表达[J]. 阎玉河,童光志,卢景良.  中国兽医学报. 1997(06)
[6]旋毛虫cDNA文库的构建[J]. 雷莉,翟朝阳,田玉,陈盛文.  实用寄生虫病杂志. 1997(01)
[7]湖北省人群旋毛虫病流行状况分析[J]. 吴炽煦,董俊美,叶建君.  中国寄生虫病防治杂志. 1996(04)
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[9]旋毛虫肌幼虫ES抗原的基因克隆及高效表达[J]. 阎玉河,许威光,陈辉,马增全,朱元晓,蔡仕英.  生物工程学报. 1994(01)
[10]旋毛虫成虫可溶性粗抗原对小鼠的免疫保护作用[J]. 朱兴全,史晓红,窦兰清,孙学勤,牛炳亨,石磊,杨书军.  中国人兽共患病杂志. 1992(05)



本文编号：3238597