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建立血管内皮细胞敲除DEPTOR基因小鼠模型及鉴定

发布时间:2021-06-28 05:55
  背景:目前关于DEPTOR与血管类疾病的研究较少,在动物体内研究尚未发现,因此建立一种新的血管内皮特异性敲除DEPTOR的小鼠模型对于研究DEPTOR与血管类疾病的关系尤为重要。目的:建立血管内皮细胞敲除DEPTOR基因纯合子小鼠模型,并进行鉴定。方法:Cre小鼠,DEPTORflox/+雄鼠,均购于美国Jackson实验室;C57野生型小鼠购自华中科技大学。实验方案经中国人民解放军中部战区总医院动物实验伦理委员会批准(批准号:20120034)。选取5只DEPTORflox/+雄鼠与10只DEPTOR flox/+雌鼠进行交配,得到基因型为EPTORflox/flox及DEPTORflox/+的F1子代小鼠35只,与8只血管内皮细胞特异性表达Tek+重组酶的Cre小鼠进行交配,一共得到基因型为Tek-Cre+×DEPTORflox/flox和DEPTORflox/flox子代小鼠共65只。... 

【文章来源】:中国组织工程研究. 2019,23(23)北大核心

【文章页数】:7 页

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文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
    1.4 实验方法
        1.4.1 DEPTORflox/flox纯合子小鼠的养殖及鉴定
        1.4.2 Tek-Cre小鼠的养殖及鉴定
        1.4.3 血管内皮细胞敲除DEPTOR基因纯合子小鼠的繁殖和鉴定
        1.4.4 Western blotting法检测Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠与单纯DEPTORflox/fllox小鼠肝脏组织的DEPTOR蛋白表达
        1.4.5 免疫荧光法检测Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠与单纯DEPTORflox/fllox小鼠主动脉血管内皮细胞的DEPTOR蛋白表达
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 DEPTORflox小鼠基因型鉴定结果
    2.2 Tek-Cre小鼠基因型鉴定结果
    2.3 血管内皮细胞敲除DEPTOR基因纯合子小鼠的鉴定结果
    2.4 Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠与DEPTORflox/flox小鼠肝脏组织DEPTOR蛋白表达
    2.5 Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠与DEPTORflox/flox小鼠胸主动脉DEPTOR免疫荧光染色结果
3 讨论Discussion


【参考文献】:
期刊论文
[1]冠心病合并糖尿病应用奥美沙坦酯对患者血管内皮细胞功能的影响作用[J]. 周政荣,丁丽娜.  北方药学. 2018(11)
[2]CD1d基因敲除小鼠拮抗DSS诱导结肠炎[J]. 李娇,陈永文,张庆镐.  免疫学杂志. 2018(09)
[3]条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠构建及鉴定[J]. 赖舒畅,邱鸿,王肖,潘道延,王桢钰,李凯,白晓春,沈洁.  实用医学杂志. 2018(04)
[4]血管内皮细胞敲除Rheb基因杂合子小鼠模型建立及意义[J]. 丁燕,赖丽芬,奈文青,单兰兰,陈顺枝,吴洪渊,唐钰,戴萌.  山东医药. 2017(36)
[5]塞来昔布抑制血管内皮细胞迁移的实验研究[J]. 许小兵,郭美霞,金鑫鑫,王彬,李敏利,张晓华.  医学研究生学报. 2017(06)
[6]源于乳腺癌干细胞的内皮细胞参与肿瘤血管形成的实验研究[J]. 李景,付焱,肖光雄,许军,王刚.  医学研究生学报. 2016(11)
[7]CD73在乳腺癌血管新生中的作用[J]. 王丽,李录英,陆齐,周平.  中国病理生理杂志. 2015(10)
[8]PI3K/Akt/mTOR信号通路及临床相关肿瘤抑制剂[J]. 陈银涛,于秉治,武迪迪.  中国生物化学与分子生物学报. 2014(10)
[9]Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能评价[J]. 王志蕊,刘西梅,周荆荣,郑新民,魏庆信,董发明,毕延震.  中国生物化学与分子生物学报. 2014(02)
[10]银杏内酯B对内皮细胞的保护作用及分子机制研究[J]. 马丽娜,陈北冬,赵艳阳,鲍利,吴伟,李兴广,齐若梅.  中国药理学通报. 2013(02)



本文编号:3253758

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