荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
发布时间:2021-07-13 03:44
抗狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)核蛋白荧光抗体具有价格昂贵、保质期短和购买周期长等缺点,非常不利于各级疾病预防控制系统对该试剂的紧急使用。作为国家狂犬病实验室,亟需研发具有自主知识产权的异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记抗RABV核蛋白单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb),并且商品化,使其广泛应用于流行病学调查和实验室的病原学和血清学诊断,实现国家狂犬病监测和检测相关试剂的标准化,从而为我国狂犬病防控提供技术支持。制备FITC标记的抗RABV核蛋白MAb,并将其初步应用于直接免疫荧光实验(Direct fluorescent assay,DFA)和快速荧光灶抑制试验(Rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)。将本实验室制备的抗RABV核蛋白MAb 3B12进行FITC标记,通过DFA确定荧光标记抗体(FITC--3B12)工作浓度,以市售FITC标记MAb作为阳性对照,对狂犬病相关临床样本进行DFA和RFFIT检测。DFA实验结果显示,FITC...
【文章来源】:病毒学报. 2019,35(03)北大核心CSCD
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料与方法
1细胞、病毒
2脑组织及血清样本
3单克隆抗体
4主要试剂
5 3B12的纯化和标记
6 FITC标记3B12工作浓度的测定
7脑组织样本的DFA检测
8血清样本的RFFIT检测
结果
1 3B12的FITC标记及工作浓度确定
2 FITC-3B12应用于DFA检测
3 FITC-3B12用于RFFIT检测
4 FITC-3B12用于RFFIT重复性检测
讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]腹水型单克隆抗体纯化方法的研究[J]. 肖增鸿,黄昭亮,林月霞,董斌,田素娟. 中国医药生物技术. 2013(06)
[2]Establishment and Preliminary Application of a Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) for Rabies Virus[J]. Pengcheng Yu,Xinjun Lv,Xinxin Shen,Qing Tang,Guodong Liang. Virologica Sinica. 2013(04)
[3]Preparation and Identification of Anti-rabies Virus Monoclonal Antibodies[J]. Wen-juan Wang1,2, Xiong Li3, Li-hua Wang2, Hu Shan1, Lei Cao2, Peng-cheng Yu2, Qing Tang2** and Guo-dong Liang2 (1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Qingdao Agricultural university, Qingdao 266109, China; 2. State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control, Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China; 3. Xinjiang Center for Disease Control and Prevention, Xinjiang 830001, China). Virologica Sinica. 2012(03)
[4]单克隆抗体纯化的研究进展[J]. 唐佳佳,李小兵,刘国文,孔涛,刘磊,杨威,王哲. 中国畜牧兽医. 2011(02)
[5]抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定[J]. 严家新,祝玉桃,李承平,徐葛林,朱家鸿. 中国人兽共患病杂志. 2000(05)
[6]FITC标记的抗Brdu单克隆抗体的研制[J]. 徐志伟,邓鸿业,韩淑红,邓玉兰,黄大无,丁桂凤. 细胞与分子免疫学杂志. 2000(02)
[7]小鹅瘟免疫荧光诊断方法的研究[J]. 潘玉民,董玉平,石全瑞,辛英. 中国兽医科技. 1990(10)
本文编号:3281270
【文章来源】:病毒学报. 2019,35(03)北大核心CSCD
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料与方法
1细胞、病毒
2脑组织及血清样本
3单克隆抗体
4主要试剂
5 3B12的纯化和标记
6 FITC标记3B12工作浓度的测定
7脑组织样本的DFA检测
8血清样本的RFFIT检测
结果
1 3B12的FITC标记及工作浓度确定
2 FITC-3B12应用于DFA检测
3 FITC-3B12用于RFFIT检测
4 FITC-3B12用于RFFIT重复性检测
讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]腹水型单克隆抗体纯化方法的研究[J]. 肖增鸿,黄昭亮,林月霞,董斌,田素娟. 中国医药生物技术. 2013(06)
[2]Establishment and Preliminary Application of a Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) for Rabies Virus[J]. Pengcheng Yu,Xinjun Lv,Xinxin Shen,Qing Tang,Guodong Liang. Virologica Sinica. 2013(04)
[3]Preparation and Identification of Anti-rabies Virus Monoclonal Antibodies[J]. Wen-juan Wang1,2, Xiong Li3, Li-hua Wang2, Hu Shan1, Lei Cao2, Peng-cheng Yu2, Qing Tang2** and Guo-dong Liang2 (1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Qingdao Agricultural university, Qingdao 266109, China; 2. State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control, Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China; 3. Xinjiang Center for Disease Control and Prevention, Xinjiang 830001, China). Virologica Sinica. 2012(03)
[4]单克隆抗体纯化的研究进展[J]. 唐佳佳,李小兵,刘国文,孔涛,刘磊,杨威,王哲. 中国畜牧兽医. 2011(02)
[5]抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定[J]. 严家新,祝玉桃,李承平,徐葛林,朱家鸿. 中国人兽共患病杂志. 2000(05)
[6]FITC标记的抗Brdu单克隆抗体的研制[J]. 徐志伟,邓鸿业,韩淑红,邓玉兰,黄大无,丁桂凤. 细胞与分子免疫学杂志. 2000(02)
[7]小鹅瘟免疫荧光诊断方法的研究[J]. 潘玉民,董玉平,石全瑞,辛英. 中国兽医科技. 1990(10)
本文编号:3281270
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/binglixuelunwen/3281270.html
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