压力对髁突软骨细胞增殖及TGF-β1mRNA表达影响的体外研究

发布时间：2021-07-15 14:02

　　[目的] 观察体外单层培养的髁突软骨细胞加载机械压力后增殖活性和转化生长因子β1mRNA（TGF-β1mRNA）表达在不同时点的变化；对压力刺激导致的TGF-β1mRNA表达与软骨细胞增殖之间的关系进行初步探讨。 [材料和方法] 选用新生SD大鼠的髁突软骨作为原代培养的组织来源，建立髁突软骨细胞有限细胞系；应用静压力加载装置对培养细胞加载强度为120g／cm²的持续压力1h。分别于加力后0、6、12、18、24h收集样本，用流式细胞仪分析各样本中细胞的DNA含量和细胞周期并计算增殖指数；用原位杂交技术检测压力作用后细胞TGF-β1mRNA的表达，以彩色病理图象分析仪检测各样本表达的阳性率。对照组细胞除不加力外，其它培养条件和检测方法与实验组相同。 [结果] 强度为120g／cm²的压力作用1h，停止加力后体外培养的髁突软骨细胞增殖活性和S期细胞百分比在加力结束时都较对照组增大（P＜0.05），但在加力后12h恢复，12～24h内实验组细胞增殖指数和S期细胞比例与对照组保持相同的变化趋势和相似的水平；实验组TGF-β1mRNA... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代培养第3天，细胞圆形或多角形，倒置相差显微镜(xloo)

图1.原代培养第3天，细胞圆形或多角形，倒置相差显微镜(xloo)图2.原代培养第4天，细胞胞膜完整、胞浆均匀，分裂相多见.倒置相差显微镜(x400)图3原代培养第12天，细胞间接触紧密，细胞以圆形为主.(x200)图4.第六代培养软骨绝大多数为长梭形。倒置相差显微镜(xlOO)

核内可见1一2个核仁，可观察到较多的细胞分裂像(图2)。接种第12天左右细胞长满瓶底，镜下见绝大多数细胞为圆形，彼此紧密接触呈“铺路石样”(图3)。四代以内，细胞生长过程中的形态与原代相似，第五代起出现长梭形细胞;至六代时，则大多数细胞变成长梭形(图4)。H一E染色后，光镜下见对数生长期的细胞呈圆形、多角形，胞体丰满，胞浆均匀，胞核大而圆(图5)。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3285844