Orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及尼古丁电流的作用

发布时间：2021-07-15 18:07

　　目的:研究orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）的作用。方法:使用7～12 d的新生SD大鼠。麻醉后,将含有腰骶膨大的脊髓分离并切片。用木瓜蛋白酶(papain,0.18 g/30 mL人工脑脊液消化切片并孵育40 min。显微镜下选取腹角,使用抛光的巴斯德吸管进行神经元的急性机械分离。对贴壁的健康神经元进行穿孔膜片钳记录。结果:①急性分离的脊髓腹角神经元状态良好,具有形状多样的胞体和完整的突起;②9个急性分离的脊髓腹角神经元有自发动作电位;③持续灌流orexin-A（OXA） 2 min后,在5例细胞记录到4个脊髓腹角神经元的自发动作电位放电频率增加了（63.64±5.25）%,幅度等参数无明显变化;④在15个神经元,有12例细胞给予0.3 mmol/L尼古丁诱导出内向电流,幅度为（142.97±75.02）pA,用100 nmol/L OXA进行2 min的预处理,可显著抑制电流幅度至（69.07±61.07）pA（P<0.001）,抑制率为（54.75±22.62）%;⑤在9个神经元中有7例细胞给予尼古丁诱导的电流幅度为（129.3... 

【文章来源】：皖南医学院学报. 2019,38(03)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

急性分离的脊髓腹角神经元的自发动作电位A:单个神经元连续放电1s，放电频率为12Hz

A:1min内神经元的自发放电;B:Orexin-A灌流2min后，同一神经元的自发放电;C:用标准细胞外液冲洗2min后同一神经元的自发放电。图3Orexin-A对脊髓腹角神经元自发动作电位的影响表1新生大鼠脊髓腹角神经元在orexin-A灌流前后的电生理参数比较Orexin-A灌流前Orexin-A灌流后配对tP动作电位幅度/mV63．90±23．3372．00±12．510．9610．407放电频率/Hz5．75±2．4916．25±7．953．3640．044阈电位/mV－48．77±12．08－51．54±5．740．4000．716超射/mV8．08±5．549．35±5．693．0040．057锋电位幅度/mV53．26±20．4961．07±10．400．7060．531半幅时程/ms2．62±0．972．94±0．741．3850．260最大上升斜率/(mV/ms)42．58±30．3439．36±25．810．6740．548上升时间/ms0．35±0．260．24±0．090．6490．563最大下降斜率/(mV/ms)－24．33±22．48－17．80±14．021．2050．314下降时间/ms0．58±0．230．94±0．591．4780．2362．4Orexin-A对脊髓腹角神经元尼古丁电流的作用在记录的15个神经元中的12例细胞，首先应用0．3mmol/L尼古丁在脊髓腹角神经元上诱发的电流幅度为(142．97±75．02)pA;再给予100nmol/Lorexin-A预处理2min后，可显著抑制尼古丁电流至(69．07±61．07)pA(P＜0．001)，抑制率为(54．75±22．62)%;使用标准细胞外液灌流冲洗2min后，再次记录尼古丁电流幅度为(108．59±62．95)pA，与给予orexin-A后记录的尼古丁电流相比，差异有统计学意义(P＜0．01)。各组间尼古丁电流幅度均值差异有统计学意义(F=3．598，P=0．039)，结果见图4。

【参考文献】：
期刊论文
[1]急性分离的脊髓腹角神经元膜片钳记录技术[J]. 高凌云,张环环,查盈盈,郑超,汪萌芽.  皖南医学院学报. 2017(06)
[2]Orexin:觉醒通路中一种重要的下丘脑神经肽[J]. 宋承辉,胡志安.  第三军医大学学报. 2003(13)



本文编号：3286204