缺氧，内皮素-1和一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞增殖，迁移和胶原合成的影响及其细胞分子生物学机制的研究

发布时间：2024-11-03 08:57

　　肺血管收缩反应增强和肺血管结构重组是缺氧性肺动脉高压（HPH）的两个主要的病理生理特点，也是HPH发生和发展的重要基础。越来越多的研究表明HPH是一种结构性疾病，即肺血管结构重组对HPH的发病机制具有更重要的意义。在慢性肺泡缺氧条件下，肺循环的所有实质都存在结构变化，而且这种变化存在于动脉壁的所有结构层，这些变化包括a)血管内膜出现纵形的平滑肌；b)外膜内大量增生的胶原和弹性蛋白的异常堆积；c)肺泡内无肌性血管出现肌化和中层平滑肌细胞的肥大和增生。作为肺血管收缩反应的主要承担者和血管结构重组的重要参与者，肺动脉平滑肌细胞（PASMC）的分化，增殖，迁移以及胶原合成的变化，对缺氧性肺血管结构重组具有非常重要的意义，但目前对其细胞分子生物学机制还了解不多。 本研究在国内外首次提出并证明PASMC可以直接感受缺氧，缺氧可诱导PASMC进入分裂周期，促进PASMC的DNA合成和细胞的分裂增殖，增强PASMC对内皮素-1（ET-1）和血小板衍生生长因子（PDGF）的增殖反应和迁移反应，并且可促进PASMC的胶原合成，同时缺氧减弱了一氧化氮（NO）供应剂硝普钠（SNP）及...

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略语表
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英文摘要
Ⅰ.前言
Ⅱ.材料与方法
    一.材料
        1.主要仪器、设备
        2.主要试剂
    二.方法
        1.主要溶液配制
        2.主要实验方法
            (1) 减压缺氧大鼠模型的建立
            (2) 组织制备
            (3) 血管收缩和舒张反应的生物测定法
            (4) 肺腺泡内动脉超微结构观察
            (5) 细胞培养
            (6) 平滑肌细胞鉴定
            (7) 细胞缺氧模型
            (8) ³H-胸腺嘧啶核苷(³H-TdR)参入
            (9) 细胞趋化反应
            (10) 美蓝染色分析
            (11) 流式细胞计测定细胞中DNA含量
            (12) ⁴⁵Ca²⁺跨膜内流测定
            (13) 胃蛋白酶消化法测定细胞胶原合成
            (14) PASMC条件培养液(PASMC-CM)的制备
            (15) PASMC细胞内cGMP放免测定
            (16) PASMC培养液中ET-1放免测定
            (17) cDNA探针的制备
            (18) cDNA探针的标记
            (19) 组织及细胞总RNA的提取
            (20) Nor thern印迹杂交
            (21) 斑点杂交
            (22) RT-PCR
            (23) 统计学处理
Ⅲ.实验结果
    一.缺氧对PASMC增殖、迁移和胶原合成的影响
        1.缺氧对PASMC增殖的影响
        2.缺氧促进PASMC的趋化反应
        3.缺氧对PASMC胶原合成的影响
    二.EDCF／ET-1和EDRF／NO对PASMC作用的多能性
        1.ET-1和NO对大鼠离体肺动脉张力的影响及缺氧可特异地破坏EDCF／ET-1和EDRF／NO作用的动态平衡
        2.ET-1和NO对PASMC增殖的影响
            (1) ET-1对PASMC增殖的影响
            (2) NO对PASMC增殖的影响
        3.PDGF、ET-1、NO和ANP对PASMC迁移的影响
            (1) PDGF诱导PASMC的趋化反应
            (2) ET-1诱导PASMC的趋化反应
            (3) NO和ANP对PDGF诱导的PASMC趋化反应的抑制作用
        4.ET-1和NO对PASMC胶原合成的影响
Ⅳ.讨论
    一.缺氧对PASMC的直接作用在HPH发病机制中的作用
    二.EDCF／ET-1和EDRF／NO对血管作用的多功能研究
    三.肺血管中EDCF／ET-1与EDRF／NO失衡在缺氧性肺血管收缩反应增强和结构重组中的作用
    四.结论
Ⅴ.参考文献
Ⅵ.文献综述
简历
致谢



本文编号：4011014