轮状病毒重组非结构蛋白NSP4 86-175 蛋白的表达及其致泻能力的研究

发布时间：2021-07-27 01:36

　　目的:构建轮状病毒重组NSP4_86-175表达蛋白,对其致泻能力进行初步评价。方法:从轮状病毒SA11病毒株中提取RNA,逆转录为cDNA,利用PCR技术扩增目的基因并制备E.coli DH5α感受态细胞,酶切pMD19T-NSP4,pMD19T-NSP4_86-175质粒和pET28a（+）质粒构建轮状病毒重组NSP4_86-175表达质粒,诱导其表达NSP4_86-175蛋白,经Glutathione SepharoseTM 4B纯化并鉴定。取新生6天乳鼠40只,随机分为四组,每组各10只。第1组腹腔注射0.5 nmol重组蛋白,第2组腹腔注射1.0 nmol重组蛋白,第3组腹腔注射1.5 nmol重组蛋白,第4组腹腔注射生理盐水作为对照组。观察其对小鼠的腹泻和生长发育的影响。结果:第1组的腹泻率为20%,第2组的腹泻率为30%,第3组的腹泻率为70%,第4组的腹泻率为10%,四组间比较,差异有统计学意义（P<0.05）,其中第3组的腹泻率最高。在体重增长情况方面,在第96小时时,第1组平均增加... 

【文章来源】：吉林医学. 2019,40(06)

【文章页数】：3 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 试剂及仪器:
    1.2 轮状病毒重组NSP486-175表达质粒的构建:
    1.3 轮状病毒重组NSP486-175的诱导表达、纯化及鉴定:
    1.4 轮状病毒重组NSP486-175感染小鼠的模型建立:
    1.5 观察方法:
    1.6 统计学处理:
2 结果
    2.1 轮状病毒重组NSP486-175表达质粒的构建:
    2.2 轮状病毒重组NSP486-175蛋白的诱导表达、纯化及鉴定:
    2.3 轮状病毒重组NSP486-175对小鼠的致泻能力:
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]轮状病毒非结构蛋白的研究进展[J]. 杨梅,陈兰举.  实用儿科临床杂志. 2010(19)
[2]两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致ICR小鼠腹泻的毒力比较[J]. 庞伟,黄永坤,孟明耀,王萍,刘建生,徐冬蕾,戚勤,侯宗柳.  医学分子生物学杂志. 2005(02)
[3]人轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致小鼠腹泻作用的初步研究[J]. 王大燕,王健伟,魏强,屈建国,于修平,洪涛.  中国病毒学. 2003(03)



本文编号：3304796