自噬抑制剂巴弗洛霉素A1对巨噬细胞极化的影响

发布时间：2021-07-26 20:13

　　目的:探讨自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1（bafilomycin A1,Baf A1）对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7极化的影响。方法:用Baf A1作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,酶联免疫吸附实验检测M1/M2极化相关细胞因子的含量;流式细胞术检测细胞表面M1/M2极化相关标志物;免疫荧光观察自噬小体形成情况;Western blot检测自噬相关蛋白水平变化。结果:Baf A1处理后,RAW264.7细胞分泌的促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）显著增高（P<0.01）,而抑炎性细胞因子IL-10和IL-13的含量变化无显著差异。Baf A1处理的细胞表面标志物中CD197和HLA-DR（M1标志物）双阳性率与对照组相比显著升高（P<0.05）,说明Baf A1可以诱导巨噬细胞向M1方向极化。免疫荧光结果显示,Baf A1处理后细胞自噬小体显著增多（P<0.05）。Western blot结果显示Baf A1处理后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达显著升高（P<0.05）,而P62蛋白表达无显著差异。在自噬激活剂雷帕霉素处理组中,自噬体同样显著增多（P... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2019,35(06)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 细胞与材料
        1.1 细胞培养与实验分组
        1.2 材料与试剂
    2 观察指标及方法
        2.1 ELISA测定炎症相关因子的含量
        2.2 流式细胞术检测细胞表面相关抗原表达
        2.3 免疫荧光化学法检测LC3-Ⅱ的表达
        2.4 Western blot检测LC3-Ⅱ和P62表达
    3 统计学处理
结 果
    1 各处理组细胞相关炎症因子的表达
    2 流式细胞术检测各处理组细胞表面极化相关标志物
    3 免疫荧光化学法检测各处理组细胞LC3-II表达
    4 Western blot法检测各组细胞自噬相关蛋白表达的变化
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]厄贝沙坦通过诱导自噬减轻db/db小鼠肝脏脂肪变[J]. 钟娟,青姚,吴曙粤,龚望球,龙海波.  中国病理生理杂志. 2018(03)
[2]糖尿病溃疡中Wnt/β-catenin信号通路表达的变化[J]. 赵亚男,刘明,张玥,王彬,张玉冬,苏海文,任晓兰,郝清智.  中国病理生理杂志. 2015(11)



本文编号：3304287