基质细胞衍生因子-1 α /CXCR4/CXCR7轴对骨髓间充质干细胞迁移的影响

发布时间：2021-07-30 22:47

　　目的探讨基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）受体CXCR4、CXCR7在骨髓间充质干细胞（BMSCs）中蛋白和mRNA的表达;及SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴对BMSCs迁移作用的可能机制。方法体外培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34。应用CXCR4特异性拮抗剂AMD3100及CXCR7中和抗体分别阻断CXCR4及CXCR7,通过Western blotting和RT-PCR分别检测BMSCs蛋白和mRNA的表达变化;Transwell法检测细胞迁移能力。本次实验分为单纯BMSCs组（A）、AMD3100预处理BMSCs组（B）、CXCR7中和抗体预处理BMSCs组（C）及AMD3100+CXCR7中和抗体预处理BMSCs组（D）。结果经鉴定第3代大鼠BMSCs中CD29和CD44均呈阳性表达,而CD34表达阴性。BMSCs中CXCR4、CXCR7蛋白和mRNA均有表达。与A组相比,B组及D组CXCR4及CXCR7蛋白表达明显受到抑制（P<0.05）,C组只有CXCR7蛋白表达降低（P<0.05）;各组CXCR4 mRNA和C... 

【文章来源】：解剖学报. 2014,45(05)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

BMSCs的培养与鉴定A．第3代BMSCs;B～D分别为流式细胞术检测第3代细胞CD44、CD34、CD29表达标尺示100μmFig．1CultureandidentificationofBMSCsA，ThethirdpassageofBMSCs;B-DistheexpressionofCD44，CD34，CD29ofthethirdpassagecellsbyflowcytometryrespectivelyBar=100μm

·642·解剖学报45卷，5期图1BMSCs的培养与鉴定A．第3代BMSCs;B～D分别为流式细胞术检测第3代细胞CD44、CD34、CD29表达标尺示100μmFig．1CultureandidentificationofBMSCsA，ThethirdpassageofBMSCs;B-DistheexpressionofCD44，CD34，CD29ofthethirdpassagecellsbyflowcytometryrespectivelyBar=100μm图2ＲT-PCＲ检测不同处理组细胞CXCＲ4mＲNA、CXCＲ7mＲNA的表达情况M．DNA分子量标准;A．单纯BMSCs组;B．AMD3100组;C．CXCＲ7中和抗体组;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗体组，不同处理组细胞与单纯BMSCs组相比，mＲNA表达无影响(x珋±s，n=3)Fig．2DetectionofCXCＲ4mＲNA，CXCＲ7mＲNAbyＲT-PCＲM，DNAmaker;A，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup．ComparedwithBMSCsgroup，theexpressionofmＲNAarenotchangedbydifferenttreatments(x珋±s，n=3)图3Westernblotting检测AMD3100及CXCＲ7中和抗体对BMSCs中CXCＲ4、CXCＲ7蛋白表达的影响A．单纯BMSCs组;B．AMD3100组;C．CXCＲ7中和抗体组;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗体组，与单纯BMSCs组相比，*P＜0.05，#P＜0.05;与AMD3100组相比，▲P＜0.05(x珋±s，n=3)Fig．3WesternblottinganalysisofCXCＲ4，CXCＲ7proteinexpressioninBMSCspretreatedwithAMD3100orCXCＲ7-specificneutralizingantibodyA，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;*P＜0.05，#P＜0.05，vsBMSCsgroup;▲P＜0.05，vsAMD3100group(x珋±s，n=3)

·642·解剖学报45卷，5期图1BMSCs的培养与鉴定A．第3代BMSCs;B～D分别为流式细胞术检测第3代细胞CD44、CD34、CD29表达标尺示100μmFig．1CultureandidentificationofBMSCsA，ThethirdpassageofBMSCs;B-DistheexpressionofCD44，CD34，CD29ofthethirdpassagecellsbyflowcytometryrespectivelyBar=100μm图2ＲT-PCＲ检测不同处理组细胞CXCＲ4mＲNA、CXCＲ7mＲNA的表达情况M．DNA分子量标准;A．单纯BMSCs组;B．AMD3100组;C．CXCＲ7中和抗体组;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗体组，不同处理组细胞与单纯BMSCs组相比，mＲNA表达无影响(x珋±s，n=3)Fig．2DetectionofCXCＲ4mＲNA，CXCＲ7mＲNAbyＲT-PCＲM，DNAmaker;A，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup．ComparedwithBMSCsgroup，theexpressionofmＲNAarenotchangedbydifferenttreatments(x珋±s，n=3)图3Westernblotting检测AMD3100及CXCＲ7中和抗体对BMSCs中CXCＲ4、CXCＲ7蛋白表达的影响A．单纯BMSCs组;B．AMD3100组;C．CXCＲ7中和抗体组;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗体组，与单纯BMSCs组相比，*P＜0.05，#P＜0.05;与AMD3100组相比，▲P＜0.05(x珋±s，n=3)Fig．3WesternblottinganalysisofCXCＲ4，CXCＲ7proteinexpressioninBMSCspretreatedwithAMD3100orCXCＲ7-specificneutralizingantibodyA，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;*P＜0.05，#P＜0.05，vsBMSCsgroup;▲P＜0.05，vsAMD3100group(x珋±s，n=3)

【参考文献】：
期刊论文
[1]纤维蛋白凝胶与几丁质对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响[J]. 李冬梅,金连弘,张宝东,杨水友,李继承.  解剖学报. 2009 (06)



本文编号：3312265