肠出血性大肠杆菌0157多重PCR检测及其stx基因缺失突变株的研究

发布时间：2021-08-31 09:32

　　肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic E．coli，EHEC），典型菌株为EHEC 0157:H7，是导致出血性结肠炎（Hemorrhagic Colitis，HC）和溶血性尿毒症（Haemolytic Uraemic Syndrome，HUS）的主要病原菌。 鉴于EHEC 0157:H7在人类疾病中的地位日益突出，许多实验室对其检测手段都已进行了深入的研究。在EHEC 0157检测上应用最为广泛的是PCR技术，它是一种简便、快速、敏感的鉴别和诊断方法。志贺毒素（Shiga toxin，Stx）由染色体上的溶原噬菌体编码，包括两个亚型Stx1和Stx2，它们相互之间没有免疫交叉反应，不同的EHEC 0157:H7分离株可能表达Stx1，Stx2，或者两种都表达；紧密素（intimin）基因eaeA位于LEE致病岛上，是导致粘附与脱落（attaching and effacing，A／E）病变的重要毒力因子；H7抗原由fliC基因编码，是EHEC 0157:H7的血清学标志之一。本研究以stx1、stx2、eaeA和fliC为目的基因设计引物，优化了PCR反应条件，... 

【文章来源】：中国人民解放军军需大学吉林省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

stx183bp缺失片段的扩增:1.P3和P4扩增产物(649bp)2.PI和PZ扩增产物(612bp);3.DNAMarker(DLZ000);4.扩增的二tx缺;

和PZ扩增产物;失基因的扩增P2与P3的5’端18个碱基臂为模板，同时兼作引物，缺失的△就x基因片段(图12345失片段的扩增:1.P3和P4;.arer

说明此菌株染色体上同源重组而交换，并且质粒/R、H7一F/R、StxZ一F/R、Stx鉴定(图7)，扩增出二e基于stXZ基因的缺失部分，因明该菌株即为EDL933w(△stx

【参考文献】：
期刊论文
[1]产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）菌苗和肠出血性大肠杆菌（EHEC）菌苗研制现状（下）[J]. 王真行.  国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册. 1999(06)



本文编号：3374660