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铜绿假单胞菌表面(氧化)低密度脂蛋白配体的研究

发布时间:2021-09-05 22:58
  【背景】研究发现铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)与(氧化)低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL/oxidized low density lipoprotein,ox LDL)具有特异性相互作用,有报道证实P. aeruginosa表达的Rah U蛋白可以与LDL/ox LDL特异性结合。【目的】验证Rah U蛋白是否是P.aeruginosa表面主要的LDL/ox LDL配体。【方法】大肠杆菌表达Rah U蛋白(r Rah U),ELISA验证r Rah U与LDL/ox LDL的相互作用。利用同源重组的方法构建RahU基因缺失突变株(ΔRahU菌株)作为阴性对照菌株,制备小鼠抗r Rah U抗体,经WesternBlot及ELISA分别检测抗r Rah U抗体与P.aeruginosa野生型菌株膜蛋白中RahU蛋白及菌体表面RahU蛋白的结合。通过ELISA方法对P. aeruginosa野生型菌株及ΔRahU菌株与LDL/ox LDL的结合差异进行比较,并对不同蛋白酶水解ΔRahU菌体表面蛋白后ΔRahU菌株与LDL/o... 

【文章来源】:微生物学通报. 2019,46(10)北大核心CSCD

【文章页数】:8 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 供试菌株及培养基
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 RahU基因缺失突变株(ΔRah U菌株)的构建
    1.4 小鼠抗rRahU抗体的制备
    1.5 P.aeruginosa野生型菌株及ΔRahU菌株膜蛋白的分离
    1.6 ELISA检测rRahU蛋白与LDL/oxLDL的相互作用
    1.7 ELISA及Western Blot检测P.aeruginosa菌株表面RahU蛋白的表达
    1.8 ELISA检测Rah U蛋白是否是P.aeruginosa CMCC10104菌株表面唯一LDL/ox LDL配体
2 结果与分析
    2.1 ΔRahU菌株的鉴定
    2.2 rRahU蛋白与LDL/oxLDL的相互作用
    2.3 RahU蛋白在P.aeruginosa细胞表面表达的鉴定
    2.4 RahU蛋白对P.aeruginosa CMCC10104与LDL/oxLDL结合的影响
    2.5 P.aeruginosa表面其他LDL/ox LDL配体的研究
3 讨论
4 结论



本文编号:3386244

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