C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生物学特性及饲养层制备

发布时间：2021-09-17 05:48

　　背景:昆明小鼠胚胎成纤维细胞是目前最常用的饲养层细胞,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层的研究鲜有报道。目的:体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,制备饲养层,力求扩大小鼠胚胎成纤维细胞的来源。方法:用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性,研究其生长规律,并制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,检测干细胞在所制备饲养层上的生长状态。结果与结论:不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生长状态好,获得的成纤维细胞数量多,增殖活跃。在细胞冻存后1,2周、1,3,6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞在第2-5代增殖旺盛,第6代以后细胞增殖出现明显下降。种植到培养皿上的C57BL/6小鼠饲养层细胞在种植后3 d内活力高,种植4 d以后细胞活力急剧下降。所以C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞来源的饲养层的最佳使用时间为灭活后3 d内,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞饲养层和昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层一样,能很好地支持胚胎干细胞及诱导多能干细胞生长。 

【文章来源】：中国组织工程研究. 2014,18(11)CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
文章亮点:
0 引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    设计:
    时间及地点:
    材料:
        实验动物:
        人胚胎干细胞和诱导性多能干细胞来源:
    实验方法:
        原代成纤维细胞分离与培养:
        成纤维细胞冻存:
        成纤维细胞复苏及存活率测定:
        EdU标记法检测细胞增殖情况:
        成纤维细胞饲养层的制备:
        MTT法检测成纤维细胞饲养层活力:
    主要观察指标:
    统计学分析:
2 结果Results
    2.1原代和传代后的成纤维细胞形态学观察
    2.2复苏后的成纤维细胞存活率
    2.3 EdU检测成纤维细胞增殖变化
    2.4培养天数对成纤维细胞饲养层质量的影响
    2.5人胚胎干细胞和人诱导性多能干细胞在不同品系成纤维细胞饲养层上生长状况
3 讨论Discussion
作者贡献:
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学术术语:
作者声明:



本文编号：3398094