肾腺苷脱氨酶及其结合蛋白的分离纯化和性质研究

发布时间：2021-10-14 18:35

　　目的：探讨人肾细胞腺苷脱氨酶（ADA）的分子特性。方法：用免疫亲和层析法分离纯化人肾ADA，测氨法测定 ADA活性，经SDS-PAGE测定其分子量。结果：获得的ADA达电泳纯，酶比活力为2561.41U/mg， 得率26.59％。经SDS-PAGE分析，全酶由45.6KD的 小分子ADA亚单位和无ADA活性的结合蛋白（ADBP， 分子量分别为68.1KD和108.7KD）构成。 用腺苷或脱氧腺苷作底物，测得全酶的Km值分别为 89μmol/L和67μmol/L，最适温度37～40℃，最适pH 6.5～7.0。对氯苯甲酸能显著抑制酶活性，二硫苏糖 醇可使被抑制的酶活性得到部分恢复。 当腺苷浓度在50～150μmol/L范围内，ADBP对ADA 活性的抑制率为18.4％～21.5％。结论：人肾细胞中ADA为小分子ADA亚单位和无ADA活性 的ADBP构成的大分子ADA，巯基是该酶活性中心的 必需基因，且ADBP对ADA活性有抑制作用。 

【文章来源】：南昌大学医学院江西省

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

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本文编号：3436642