Sertoli细胞对同种异体调节性T细胞/辅助性T细胞17分化平衡的调节作用

发布时间：2021-11-03 22:49

　　目的研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞（Treg）/辅助性T细胞17（Th17）平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察Sertoli细胞形态,采用Western blot检测Sertoli细胞中人类主要组织相容性复合体（MHC）-Ⅱ、B7-H1蛋白的表达,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测Sertoli细胞培养上清内的转化生长因子（TGF）-β1、IL-17A等细胞因子水平;流式细胞术观察混合培养细胞分化结果。结果成功在体外培养Sertoli细胞;Western blot结果显示,Sertoli细胞与同种异体Na?ve CD4+T细胞（CD4+CD62L+CD25-）在体外混合培养时,其表面的MHC-Ⅱ类分子和B7-H1分子的表达量增加;ELISA结果显示,与同种异体Na?ve CD4+T细胞混合培养72h后,培养上清液中的TGF-β1浓度较单纯Sertoli培养组显著升高[（823.10±59.07）pg/mL vs.（17... 

【文章来源】：华中科技大学学报(医学版). 2014,43(06)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 Sertoli细胞分离与培养
    1.3 光学显微镜及电子显微镜下观察Sertoli细胞
    1.4 T淋巴细胞分离
    1.5 骨髓来源的DC细胞分离与培养
    1.6 混合细胞培养
        1.6.1 Sertoli细胞与同种异体T细胞混合培养
        1.6.2 DC细胞与同种异体T细胞混合培养
    1.7 Western blot检测
    1.8 分泌细胞因子检测
    1.9 流式细胞术检测
    1.1 0 统计学分析
2 结果
    2.1 小鼠Sertoli细胞的形态学观察
    2.2 Sertoli细胞中B7-H1、MHC-Ⅱ的表达
    2.3 Sertoli与同种异体Na6ve CD4+T细胞体外混合培养促进TGF-β1的分泌
    2.4 Sertoli细胞体外诱导Na6ve CD4+T细胞分化为CD25+Foxp3+Treg细胞
    2.5 Sertoli/Treg细胞混合培养上清液抑制DC细胞诱导Na6ve CD4+T细胞分化为Th17
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]转化生长因子-β不同亚型对前软骨干细胞增殖分化的影响[J]. 丁然,王庆,蔡贤华.  华中科技大学学报(医学版). 2013(06)
[2]调节性T细胞与Th17细胞的失衡及其对大鼠肺纤维化的影响[J]. 万勇,张念,李剑平,孙洁民.  华中科技大学学报(医学版). 2013(02)



本文编号：3474488