呼吸道合胞病毒感染对气道上皮细胞表皮生长因子受体、紧密连接相关蛋白及黏蛋白表达的影响
发布时间：2021-11-09 12:55
目的探讨呼吸道合胞病毒（RSV）感染气道上皮细胞后对表皮生长因子受体（EGFR）、紧密连接相关蛋白occludin及E-cadherin、黏蛋白MUC5AC表达的影响,并探讨可能的机制。方法体外实验分两组,以人气道黏液上皮细胞NCI-H292细胞为研究对象,紫外线下灭活的RSV加入NCI-H292细胞培养基中作为对照组,迅速解冻的RSV感染NCI-H292细胞为RSV感染组。48 h后通过Western blot法检测occludin、E-cadherin、磷酸化EGFR（p-EGFR）及EGFR的蛋白表达水平;采用细胞免疫荧光技术观察两组细胞occludin、E-cadherin的分布及表达;采用RT-PCR法检测两组MUC5AC mRNA的表达。结果 RSV感染组occludin、E-cadherin的蛋白表达水平较对照组下降（P<0.05）。RSV感染组p-EGFR及EGFR蛋白的表达水平较对照组升高（P<0.05）。RSV感染组MUC5AC mRNA表达水平较对照组增加（P<0.05）。结论 RSV可破坏气道上皮细胞间的紧密连接,促进黏蛋白的分泌,影响气道的屏...
【文章来源】：中国当代儿科杂志. 2019,21(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
Westernblot法检测两组occludin及E-cadGAPDH
第21卷第3期2019年3月中国当代儿科杂志ChinJContempPediatrVol.21No.3Mar.2019·297·对照组对照组RSV感染组RSV感染组图3Westernblot法检测两组p-EGFR及EGFR蛋白的表达变化左图为蛋白电泳条带图；右图为两组目的蛋白表达统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。图4RT-PCR法检测两组MUC5ACmRNA的表达左图为PCR扩增产物的凝胶电泳图，M：Marker，1：对照组，2：RSV感染组；右图为MUC5ACmRNA相对表达量统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。p-EGFREGFRGAPDH图2免疫荧光染色法检测RSV感染NCI-H292细胞48h后occludin及E-cadherin的表达变化（×300）左图为细胞免疫荧光图，绿色荧光为目的蛋白的阳性表达；RSV感染组occludin及E-cadherin的阳性表达均弱于对照组。右图为两组目的蛋白平均荧光强度统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.01。occludinE-cadherin对照组RSV感染组3讨论RSV感染组EGFR的磷酸化水平明显增加，提示RSV可致EGFR活化。EGFR定位于细胞膜基底外侧，其胞内区有酪氨酸激酶活性，当配体与EGFR结合导致受体自身的酪氨酸残基磷酸化，可募集相关信号转运蛋白，激活下游信号通路。RSV介导的EGFR活化可导致下游ERK活性增加，促进IL-8释放并抑制RSV感染细胞的凋亡[12]；可抑制干扰素调节因子1依赖性干扰素-λ的产生，增加RSV的感染滴度，而抑制EGFR活化能降低病毒的感染滴度[13]。上述发现提示抑制EGFR的300bp500bp300bp500bpMUC5ACGAPDHM12平均免疫荧光强度蛋白相对表达量MUC5ACmRNA相对表达量0.080.060.040.0200.60.40.200.50.40.30.20.10occludinEGFRE-cad
第21卷第3期2019年3月中国当代儿科杂志ChinJContempPediatrVol.21No.3Mar.2019·297·对照组对照组RSV感染组RSV感染组图3Westernblot法检测两组p-EGFR及EGFR蛋白的表达变化左图为蛋白电泳条带图；右图为两组目的蛋白表达统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。图4RT-PCR法检测两组MUC5ACmRNA的表达左图为PCR扩增产物的凝胶电泳图，M：Marker，1：对照组，2：RSV感染组；右图为MUC5ACmRNA相对表达量统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。p-EGFREGFRGAPDH图2免疫荧光染色法检测RSV感染NCI-H292细胞48h后occludin及E-cadherin的表达变化（×300）左图为细胞免疫荧光图，绿色荧光为目的蛋白的阳性表达；RSV感染组occludin及E-cadherin的阳性表达均弱于对照组。右图为两组目的蛋白平均荧光强度统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.01。occludinE-cadherin对照组RSV感染组3讨论RSV感染组EGFR的磷酸化水平明显增加，提示RSV可致EGFR活化。EGFR定位于细胞膜基底外侧，其胞内区有酪氨酸激酶活性，当配体与EGFR结合导致受体自身的酪氨酸残基磷酸化，可募集相关信号转运蛋白，激活下游信号通路。RSV介导的EGFR活化可导致下游ERK活性增加，促进IL-8释放并抑制RSV感染细胞的凋亡[12]；可抑制干扰素调节因子1依赖性干扰素-λ的产生，增加RSV的感染滴度，而抑制EGFR活化能降低病毒的感染滴度[13]。上述发现提示抑制EGFR的300bp500bp300bp500bpMUC5ACGAPDHM12平均免疫荧光强度蛋白相对表达量MUC5ACmRNA相对表达量0.080.060.040.0200.60.40.200.50.40.30.20.10occludinEGFRE-cad
【参考文献】：
期刊论文
[1]E-cadherin在EGFR分子靶向治疗中作用的研究进展[J]. 邢荣春,郑军,刘伟,姚汝铖. 肝胆胰外科杂志. 2013(02)
本文编号：3485386
【文章来源】：中国当代儿科杂志. 2019,21(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
Westernblot法检测两组occludin及E-cadGAPDH
第21卷第3期2019年3月中国当代儿科杂志ChinJContempPediatrVol.21No.3Mar.2019·297·对照组对照组RSV感染组RSV感染组图3Westernblot法检测两组p-EGFR及EGFR蛋白的表达变化左图为蛋白电泳条带图；右图为两组目的蛋白表达统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。图4RT-PCR法检测两组MUC5ACmRNA的表达左图为PCR扩增产物的凝胶电泳图，M：Marker，1：对照组，2：RSV感染组；右图为MUC5ACmRNA相对表达量统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。p-EGFREGFRGAPDH图2免疫荧光染色法检测RSV感染NCI-H292细胞48h后occludin及E-cadherin的表达变化（×300）左图为细胞免疫荧光图，绿色荧光为目的蛋白的阳性表达；RSV感染组occludin及E-cadherin的阳性表达均弱于对照组。右图为两组目的蛋白平均荧光强度统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.01。occludinE-cadherin对照组RSV感染组3讨论RSV感染组EGFR的磷酸化水平明显增加，提示RSV可致EGFR活化。EGFR定位于细胞膜基底外侧，其胞内区有酪氨酸激酶活性，当配体与EGFR结合导致受体自身的酪氨酸残基磷酸化，可募集相关信号转运蛋白，激活下游信号通路。RSV介导的EGFR活化可导致下游ERK活性增加，促进IL-8释放并抑制RSV感染细胞的凋亡[12]；可抑制干扰素调节因子1依赖性干扰素-λ的产生，增加RSV的感染滴度，而抑制EGFR活化能降低病毒的感染滴度[13]。上述发现提示抑制EGFR的300bp500bp300bp500bpMUC5ACGAPDHM12平均免疫荧光强度蛋白相对表达量MUC5ACmRNA相对表达量0.080.060.040.0200.60.40.200.50.40.30.20.10occludinEGFRE-cad
第21卷第3期2019年3月中国当代儿科杂志ChinJContempPediatrVol.21No.3Mar.2019·297·对照组对照组RSV感染组RSV感染组图3Westernblot法检测两组p-EGFR及EGFR蛋白的表达变化左图为蛋白电泳条带图；右图为两组目的蛋白表达统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。图4RT-PCR法检测两组MUC5ACmRNA的表达左图为PCR扩增产物的凝胶电泳图，M：Marker，1：对照组，2：RSV感染组；右图为MUC5ACmRNA相对表达量统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.05。p-EGFREGFRGAPDH图2免疫荧光染色法检测RSV感染NCI-H292细胞48h后occludin及E-cadherin的表达变化（×300）左图为细胞免疫荧光图，绿色荧光为目的蛋白的阳性表达；RSV感染组occludin及E-cadherin的阳性表达均弱于对照组。右图为两组目的蛋白平均荧光强度统计图（n=3），a示与对照组比较，P<0.01。occludinE-cadherin对照组RSV感染组3讨论RSV感染组EGFR的磷酸化水平明显增加，提示RSV可致EGFR活化。EGFR定位于细胞膜基底外侧，其胞内区有酪氨酸激酶活性，当配体与EGFR结合导致受体自身的酪氨酸残基磷酸化，可募集相关信号转运蛋白，激活下游信号通路。RSV介导的EGFR活化可导致下游ERK活性增加，促进IL-8释放并抑制RSV感染细胞的凋亡[12]；可抑制干扰素调节因子1依赖性干扰素-λ的产生，增加RSV的感染滴度，而抑制EGFR活化能降低病毒的感染滴度[13]。上述发现提示抑制EGFR的300bp500bp300bp500bpMUC5ACGAPDHM12平均免疫荧光强度蛋白相对表达量MUC5ACmRNA相对表达量0.080.060.040.0200.60.40.200.50.40.30.20.10occludinEGFRE-cad
【参考文献】：
期刊论文
[1]E-cadherin在EGFR分子靶向治疗中作用的研究进展[J]. 邢荣春,郑军,刘伟,姚汝铖. 肝胆胰外科杂志. 2013(02)
本文编号：3485386
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/binglixuelunwen/3485386.html
最近更新
教材专著
