miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响

发布时间：2021-11-25 19:40

　　观察miR-7基因敲减（knockdown, KD）对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,并初步探讨其机制。分别用0、50、100、200 ng/mL LPS刺激野生型（wild type, WT）小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,经实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR, Real-time PCR）检测发现,随着LPS刺激浓度的增加,巨噬细胞中miR-7的表达水平逐渐升高,且在100 ng/mL LPS浓度刺激下miR-7表达最显著（P<0.01）。用100 ng/mL LPS处理miR-7 KD小鼠和WT小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,镜检观察到巨噬细胞形态均由圆形变为长梭形,并伸出长长的伪足。应用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD80和CD86分子的表达情况,结果显示,LPS作用后,miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞表面CD80和CD86的比例较WT小鼠显著上调（P<0.05）。Real-time PCR和ELISA结果显示,miR-7 KD小鼠巨噬细胞在LPS刺激后,炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-ɑ的表达... 

【文章来源】：现代免疫学. 2019,39(03)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 小鼠骨髓来源巨噬细胞的诱导、培养
    1.4 LPS刺激巨噬细胞
    1.5 流式细胞术检测巨噬细胞表面分子的表达
    1.6 Real-time PCR检测细胞内炎性因子和miR-7 mRNA水平
    1.7 ELISA检测血清中炎性因子水平
    1.8 Western blotting检测细胞内NF-κB p65和p-NF-κB p65蛋白表达情况
    1.9 统计学处理
2 结果
    2.1 LPS作用下WT小鼠骨髓来源巨噬细胞中miR-7基因的表达
    2.2 miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞中miR-7基因的表达
    2.3 LPS作用下小鼠骨髓来源巨噬细胞的形态及表面分子的变化
    2.4 LPS作用下miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞炎性因子的表达变化
    2.5 LPS作用下miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞中NF-κB p65和p-NF-κB p65蛋白的表达变化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Damage-associated molecular patterns in inflammatory bowel disease: From biomarkers to therapeutic targets[J]. Hayandra Ferreira Nanini,Claudio Bernardazzi,Fernando Castro,Heitor Siffert Pereira de Souza.  World Journal of Gastroenterology. 2018(41)
[2]微小RNA-7基因敲减对LPS诱导的脑部炎症的影响[J]. 岳东旭,赵娟娟,胡琳,陈慧子,丁涛,潘飞飞,陈超,郭萌萌,徐林.  现代免疫学. 2018(05)
[3]MicroRNA-7基因敲减小鼠模型的鉴定[J]. 朱顺飞,李永菊,陈超,胡燕,赵娟娟,郭萌萌,陶弋婧,秦娜琳,徐林.  遵义医学院学报. 2014(06)
[4]pG-miR-7-Sponge转基因小鼠载体的构建及鉴定[J]. 李永菊,周涯,陈超,朱顺飞,胡燕,秦娜琳,郑静,徐林.  遵义医学院学报. 2014(02)



本文编号：3518668