人白细胞间素2及其单克隆抗体的生物学和初步应用

发布时间：2021-12-17 07:53

　　利用细胞生物学、细胞工程及分子生物学技术系统地研究了人白细胞间素2（IL-2）的细胞生物学及分子生物学，制备了一组生物学特性多样化的抗IL-2单克隆抗体（McAb），对IL-2及其McAb的实验室和临床应用也进行了探讨，主要取得了以下结果： 一、探讨了与建立稳定的IL-2生物活性测定体系有关的若干问题：在解决了IL-2依赖株细胞冻存和复苏困难的问题的同时，又建立了以大鼠脾脏母细胞（RB）为基础的IL-2测活方法，弥补了依赖株和小鼠脾脏母细胞测活方法中的缺陷。建立了一个稳定、有效的、以依赖株方法为主，RB方法为辅的IL-2生物学活性测定体系。 二、系统研究了人扁桃体淋巴细胞（TLC）和Jurkat细胞系产生IL-2的细胞学基础，实现了IL-2超诱导制备，最大制备滴度可达3,000u／ml。对超诱导制备的机制也进行了探讨。 三、研究了Jurkat细胞克隆化的促进因素；经连续克隆化，筛选，建立了稳定、高产的IL-2分泌株，JurkatⅡ-3。其产生IL-2的水平与国外报道的水平相一致，最大分泌活性可达3,000u／ml。 四、利用聚合酶链反应（PCR）技术和引进的IL... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文提要
英文提要
前言
文献回顾
    1、IL-2的基因及分子生物学
        1.1 IL-2的基因组成和表达
        1.2 IL-2的分子结构
        1.3 IL-2的受体结合位点
        1.4 IL-2的细胞生物学
        1.5 IL-2与癌基因和人类T细胞白血病病毒(HTLV)的关系
    2.抗IL-2单克隆抗体的制备、生物学特征及其应用研究的进展
        2.1 抗IL-2 McAb制备的研究概况
        2.2 抗IL-2杂交瘤细胞系建立中的几个具体问题
        2.3 抗IL-2 McAb的生物学特性
        2.4 抗IL-2 McAb的应用
    3.IL-2的应用前景和方向
        3.1 用于肿瘤的治疗
        3.2 用于感染性疾病的治疗
        3.3 作为新佐剂用于增强亚单位疫苗的预防效力
        3.4 制备IL-2类似物,用于临床治疗
研究内容
    第一部分 IL-2生物学的研究
        一、IL-2生物学测活方法若干问题的再探讨
        二、IL-2细胞分泌的动态、超诱导制备及其机制的探讨
        三、Jurkat细胞克隆化及IL-2高产株的建立
        四、基因重组IL-2在大肠杆菌中的高效表达
    第二部分 抗IL-2多价及单克隆抗体的制备及其生物学特性
        一、抗IL-2高效价抗血清及单克隆抗体的制备
        二、用亲和力排列和亲和指数确定抗IL-2单克隆抗体的用途
        三、抗IL-2多价及单克隆抗体的生物学特征
        四、用简便的排阻ELISA快速确定抗IL-2单克隆抗体的构象表位相关性
    第三部分 抗IL-2多价及单克隆抗体的应用研究
        一、用单克隆抗体研究IL-2及其改构体的功能域和抗原性
        二、用单克隆抗体确定IL-2分泌细胞及其临床应用的初步研究
        三、测定人IL-2的ELISA及其影响因素的探讨
    第四部分 IL-2抗肿瘤和抗感染的临床及实验研究
        一、IL-2诱导的LAK细胞及其临床试用
        二、IL-2抗结核杆菌的实验研究
小结
致谢
参考文献



本文编号：3539694