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硫氧还原蛋白融合表达载体的构建与纯化方法的初步研究

发布时间:2021-12-16 21:15
  前言 分子生物学技术作为新技术革命的重要组成部分涉及到生命科学研究领域的各个方面,在现代环境卫生学的研究内容中,无法快速得到目的蛋白或多肽成为制约其发展的一项重要因素。利用蛋白质表达技术,快速、简便地进行有关活性代谢产物的高效表达进而研究其生物学功能和理化特性成为一种新的方法。其中融合蛋白表达技术由于容易实现高效表达、纯化步骤简便、产物多以活性形式存在而得到广泛应用,尤其在小分子多肽研究中受到亲睐,为研究蛋白质发挥作用机理的活性中间产物的理化性质和生物学作用开辟了新天地。 硫氧还原蛋白(Trx)是一种热稳定性蛋白分子伴侣,在多种情况下,可使异源蛋白质正确的折叠,表现出全部生物学活性,具有的热稳定性常可作为纯化Trx融合蛋白的方式而倍受重视,但目前使用的载体表达效率不高,表达产物需要蛋白酶切割,并且其第38位为甲硫氨酸,是特异性裂解的酶切位点,在使用溴化氰作定点切除时,无法得到单一的目的片段产物而限制了其应用。由于Trx具有分子较小,结构简单,易于改造的特点,本研究采用基因定点突变技术,对其基因进行了改造,构建了新型硫氧还原蛋白载体并以线虫抗凝肽(ATP)为模型,对纯化方法及... 

【文章来源】:中国医科大学辽宁省

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 英文缩略语
四、 前言
五、 实验材料
六、 实验方法
七、 实验结果
八、 讨论
九、 结论
十、 论文图片
十一、 参考文献
十二、 致谢
十三、 个人简介


【参考文献】:
期刊论文
[1]ThioFusion表达系统──大肠杆菌中表达可溶性蛋白的重大突破[J]. 马雪梅,黄秉仁,蔡良婉.  生命的化学(中国生物化学会通讯). 1995(03)



本文编号:3538830

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