结核分枝杆菌特异性抗原的制备及其抗原性的初步研究

发布时间：2021-12-23 00:31

　　结核杆菌是结核病的病原菌。结核杆菌侵入机体进行繁殖，释放大量抗原尤其是蛋白抗原，选择性刺激B细胞丛产生大量免疫球蛋白，急性早期阶段以IgA、 IgM升高为主，此后IgG水平逐渐升高，升高的程度与病情轻重相关[1]。因此，检测体液中的抗结核抗体对结核病的诊断有重要的辅助作用。引起免疫反应的结核抗原多而复杂，为了寻找敏感性高特异性强的结核抗原，本实验利用基因工程技术重组结核分枝杆菌蛋白抗原，从结核分枝杆菌中提取菌体蛋白和脂多糖抗原，并对这些抗原进行抗原性分析。首先，从结核分枝杆菌标准株H37Rv中提取DNA作为模板，根据GenBank提供的蛋白基因序列设计引物，通过PCR法克隆38KDa和14KDa蛋白基因，利用表达载体PET-30a（＋）和PET-22b（＋）分别以包涵体和可溶性蛋白的形式表达该蛋白，再利用离子亲和层析方法对蛋白进行纯化，获得高纯度的目的蛋白，经Western Blot检测表明两种重组蛋白都具有良好的抗原性。其次，为了获得结核杆菌菌体蛋白和脂多糖抗原，利用改良的液体苏通培养基培养大量的结核分枝杆菌，收集菌体，冰浴超声破<WP=7>碎，用酚/氯仿抽提提取菌体蛋白... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

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英文摘要
前言
第一部分 结核分枝杆菌特异性蛋白抗原的基因克隆、表达及纯化
第二部分 结核分枝杆菌脂多糖和菌体蛋白的制备
第三部分 结核分枝杆菌特异性抗原的抗原性分析
全文总结
参考文献
综述
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]结核分支杆菌重组38000蛋白的免疫原性特征[J]. 何秀云,庄玉辉,张晓刚,熊志红,董蒽军,史迎昌,昌增益.  中华结核和呼吸杂志. 2000(08)



本文编号：3547412