microRNA-214-3p在周期性张应变诱导内皮祖细胞分化和增殖中的作用

发布时间：2021-12-25 07:16

　　目的探讨microRNA-214-3p（miR-214-3p）在周期性张应变诱导内皮祖细胞（endothelial progenitor cells, EPCs）分化和增殖中的作用。方法采用FX-5000T细胞周期性张应变加载装置对EPCs施加生理水平的周期性张应变（5%幅度、1.25 Hz频率）,加载时间24 h。应用miRNAs芯片筛选周期性张应变调控下差异表达的miRNAs,并挑选miR-214-3p进行深入研究。实时荧光定量PCR方法检测EPCs内平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）相标志分子的表达,BrdU结合酶联免疫吸附ELISA法检测EPCs增殖功能。之后,使用miR-214-3p抑制剂抑制miR-214-3p的表达,检测EPC内VSMC相标志分子表达及EPCs增殖。结果周期性张应变显著抑制miR-214-3p表达,并抑制EPCs向VSMC相分化,同时显著促进EPCs增殖。在静态条件下,使用miR-214-3p抑制剂干扰miR-214-3p的表达,miR-214-3p水平下降同样会抑制EPCs向VSMC相分化,并且诱导EPC... 

【文章来源】：医用生物力学. 2019,34(01)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 EPCs分离及原代培养
    1.2 EPC鉴定
    1.3 周期性张应变加载
    1.4 miRNA inhibitor转染
    1.5 实时qPCR
        1.5.1 mRNA逆转录及实时PCR
        1.5.2 miRNA逆转录及实时PCR
    1.6 BrdU ELISA检测细胞增殖
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 双荧光标记法鉴定EPCs
    2.2 周期性张应变对EPCs功能的影响
    2.3 周期性张应变抑制miR-214-3p表达
    2.4 miR-214-3p调控EPCs功能
3 讨论
4 结语


【参考文献】：
期刊论文
[1]microRNA-133b在低切应力诱导血管内皮细胞影响血管平滑肌细胞增殖中的作用[J]. 马英英,王璐,包晗,韩悦,齐颖新.  医用生物力学. 2016(05)



本文编号：3552022