汉滩病毒核衣壳蛋白主要线性抗原表位的研究 ——基因定位、原核表达及其表达产物的抗原性和免疫原性

发布时间：2021-12-27 18:25

　　汉坦病毒是一种有囊膜、分节段的单股负链RNA病毒，基因组由L、M、S三个片段构成。L片段编码病毒RNA聚合酶，M片段编码囊膜糖蛋白G1和G2，S片段编码核衣壳蛋白NP（简称核蛋白）。囊膜糖蛋白上具有中和及血凝抗原位点，可诱导中和抗体和保护性细胞免疫反应；核蛋白上虽无中和性抗原位点，但仍可诱导保护性细胞免疫。 血清学研究表明，汉坦病毒核蛋白具有很强的抗原性和免疫原性，病人对核蛋白的抗体应答不仅出现早，且滴度高。进一步研究发现，核蛋白N端约100个氨基酸大部分具有亲水性，且能被病人、免疫动物血清及许多单克隆抗体所识别，运用缺失突变法表达的汉坦病毒核蛋白N端多肽保持了天然完整NP良好的抗原性和免疫原性，已用于肾综合征出血热和汉坦病毒肺综合征的血清学诊断，但该抗原表位精确的一级结构及其基因定位迄今尚未明确。噬菌体表面呈现技术的出现为大量快速地筛检基因——多肽文库提供了可能。 本研究首先采用噬菌体表面呈现技术建立了汉坦病毒代表株汉滩病毒76-118株S基因随机多肽片段的噬菌体文库，用单克隆抗体对其进行筛检，确定了汉滩病毒核蛋白的主要线性抗原表位，并在此基础上。用pGEX融合蛋白表达 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图SA噬菌体表位文库构建与筛选示意图

图SB噬菌体表位文库构建与筛选示意图

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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3552491