内毒素、组织胺作用下内皮细胞通透性的变化及差异蛋白质组研究

发布时间：2022-01-01 09:47

　　完整的内皮屏障对维持正常的血液循环和组织器官的正常功能具有十分重要的作用。内皮细胞通透性升高是炎性反应的重要特点,是微血管功能障碍的主要表现,也是引起组织缺氧和细胞代谢障碍的重要原因之一。内皮细胞通透性改变的机制及其调控十分复杂,涉及众多炎症介质、细胞因子、受体及信号传导系统。迄今为止,虽然国内外对此进行了大量研究,对内皮细胞通透性调控机制也取得了较为深入的认识,但其确切机理尚未完全阐明。而且,目前的研究多采用细胞生物学、分子生物学方法,利用蛋白质组学方法研究内皮细胞通透性的相关蛋白质,国内外尚鲜见报道。由于内毒素（LPS）是常见的致炎物质,组织胺则是内源性炎症介质,两者均可导致微血管内皮细胞通透性升高,但两者作用存在较大差异。本实验首先研究内毒素血症时大鼠肺、肠组织微血管通透性的改变及内毒素和组织胺对体外培养脐静脉内皮细胞通透性的影响,并在此基础上,应用双向电泳、图象分析和质谱分析等蛋白质组学方法研究通透性相关的蛋白质组改变,探讨LPS和组织胺作用下体外培养内皮细胞蛋白表达的差异性。主要结果及结论如下: 1.在大鼠内毒素血症模型上,5 mg/kg和10 mg/kg LPS均可造... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

内皮细胞接种后96h，细胞形态呈梭形或鹅卵石样，10x10

子免疫组化鉴定，95%以上的内皮细胞胞浆内存在棕即姗因子阳性细胞，并且可见核分裂相，10X40。内皮细胞通透性的影响均可引起内皮细胞通透性增加，并呈剂量依赖性10一mofL/组织胺可以显著增加内皮细胞的LPS和组织胺对单层内皮细胞通透速率的影响(下3，LPS(pg/ml)110100组.558士0一0250.613士0.0730.669士0.087*0.588士0.1090.05，**尸<.001

用AO一EB染色后，活细胞的胞核呈绿色网状结构，胞浆有红一橙色颗粒;凋亡细胞可见细胞收缩变圆，整个细胞呈均匀的绿色;坏死细胞则呈明亮的红色。对照组细胞生长正常，无凋亡和坏死细胞出现(图5)。1pgLPS和10pgLPs处理后可见个别凋亡细胞(图6，7)，而100协gLPS处理后凋亡细胞增多，并可出现坏死细胞(图8)。10.7mouL组织胺作用下内皮细胞基本正常(图9)，10一6molL/组织胺可使细胞收缩变圆，出现凋亡早期表现(图10)，而10一smolL/组织胺作用后则可见有凋亡晚期或坏死细胞出现(图11)。图5对照组细胞经AO一EB染色，可见细胞生长正常，图6无凋亡或坏死细胞。lp创mlLPS处理内皮细胞后

【参考文献】：
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本文编号：3562119