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抑制AQP1表达对Balb/c 3T3成纤维细胞凋亡的影响

发布时间:2022-01-05 17:55
  目的水的跨膜转运对维持细胞的正常代谢具有重要作用。1992年以来大量研究证实机体内广泛存在着特异性的水通道蛋白家族(Aquaporins,AQPs)。AQP1在体内扮演着重要角色,参与渗透压驱动下的水的转运,介导药理作用,和参与水肿的形成等。但AQP1与凋亡之间是否存在着联系,现在还有争议。本实验应用特异性靶向AQP1表达基因的siRNA(short interfering RNA),抑制小鼠Balb/c 3T3成纤维细胞的AQP1的表达。并通过观察α-溶血素对这种AQP1表达受抑制的细胞所造成的表型变化,初步探讨AQP1在细胞凋亡中的作用。方法1、实验分三组:normal cell组,为正常细胞;control-RNAi组,为非特异性靶向AQP1的siRNA转染的细胞;AQP1-RNAi组,为特异性靶向AQP1的siRNA转染的细胞。应用α-溶血素(30ug/ml)作用于细胞,4h后观察细胞的表型的变化。2、western blot检测AQP1蛋白量,倒置显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检验细胞凋亡率。结果1、利用RNAi转染技术抑制成纤维细胞Balb/c3T3的AQP1表达,w... 

【文章来源】:中国医科大学辽宁省

【文章页数】:42 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

抑制AQP1表达对Balb/c 3T3成纤维细胞凋亡的影响


柱状图表示各组AQPI表达所占normolcen组的相对百分比

溶血素,细胞形态,倒置显微镜,组间


未加a一溶血素,倒置显微镜观normaleell组x200,b:eontrol一RNAi组各组细胞在形态上无明显变化,组间无显

溶血素,倒置显微镜,细胞的,脱落细胞


RNAi组发生变化的细胞及脱落细胞的数目较其余两组多,且细胞变圆、皱缩也较其余两组变化显著(图4)。图3,未加a一溶血素,倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。a: normaleell组x200,b:eontrol一RNAi组x200,e:AQPI一RNAi组x200。各组细胞在形态上无明显变化,组间无显著差异。

【参考文献】:
期刊论文
[1]Inhibitory effect of topiramate on Lewis lung carcinoma metastasis and its relation with AQP1 water channel[J]. Bing MA, Yang XIANG, Tao LI, He-ming YU, Xue-jun LIDepartment of Pharmacology, School of Basic Medical Sciences, Peking University, Beijing 100083; National Research Institute for Family Planning, Beijing 100081, China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2004(01)
[2]水通道蛋白1和5在急性肺损伤大鼠的表达[J]. 焦光宇,李尔然,于润江.  中华内科杂志. 2003(06)



本文编号:3570808

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